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La microbiología estudia organismos demasiado pequeños para el ojo humano. Como no es posible observarlos en la naturaleza, los investigadores los cultivan en el laboratorio utilizando técnicas especializadas, como el subcultivo, para mantener poblaciones saludables.
Los microorganismos necesitan un “hogar” que les proporcione nutrientes, elimine los desechos y les ofrezca una estructura física adecuada. Los "hogares" más comunes son los caldos líquidos y los agares semisólidos, cada uno formulado para apoyar el crecimiento general o favorecer especies específicas.
A medida que las células se metabolizan, su medio puede quedarse sin nutrientes y acumular subproductos tóxicos. El subcultivo (transferir un pequeño inóculo a un medio nuevo) previene el crecimiento excesivo, mantiene baja la contaminación y garantiza resultados experimentales consistentes.
Las muestras ambientales o clínicas suelen contener comunidades mixtas. Al esparcir una muestra sobre agar con un asa de inoculación, se extienden las células lo suficientemente finas como para que cada colonia resultante se origine a partir de un solo microorganismo. Este aislamiento es el primer paso hacia una identificación precisa de las especies.
Una vez que las colonias distintas sean visibles, se puede realizar un segundo subcultivo seleccionando una sola colonia y transfiriéndola a un caldo fresco o a una placa de agar. El cultivo resultante es ahora una cepa pura, lista para pruebas bioquímicas, secuenciación o ensayos de susceptibilidad a antibióticos.
Un subcultivo eficaz requiere una técnica estéril, el momento adecuado (normalmente 24 a 48 h para las bacterias de rápido crecimiento) y conocimiento de las necesidades de crecimiento del organismo. Para conocer protocolos detallados, consulte las Pautas de microbiología de los CDC . .
