1. Elija las bacterias objetivo:
- Los investigadores seleccionan una especie o cepa bacteriana específica que sea relevante para su investigación o aplicación.
2. Identifique el comportamiento deseado:
- Determinan el nuevo comportamiento o función que quieren enseñar a las bacterias. Esto puede variar desde producir una molécula específica hasta responder a estímulos ambientales.
3. Diseñar las modificaciones genéticas:
- Los investigadores diseñan secuencias de ADN que codifican las proteínas deseadas o los elementos reguladores responsables del nuevo comportamiento. Estas modificaciones a menudo se basan en información genética existente de otros organismos o mediante el diseño racional de proteínas.
4. Construir vectores genéticos:
- Se utilizan vectores genéticos, como plásmidos o vectores virales, para introducir las secuencias de ADN diseñadas en las bacterias. Los plásmidos son pequeñas moléculas circulares de ADN que pueden replicarse independientemente del cromosoma bacteriano.
5. Transforma las bacterias:
- Los investigadores utilizan diversas técnicas para introducir los vectores construidos en las bacterias objetivo. Los métodos comunes incluyen electroporación, transformación química o conjugación.
6. Selección y cribado:
- Después de la transformación, las bacterias se someten a una presión selectiva para garantizar que sólo sobrevivan y crezcan aquellas que incorporaron con éxito el nuevo material genético. Esto puede involucrar marcadores de resistencia a antibióticos u otros rasgos seleccionables.
7. Caracterización y validación:
- Luego se caracterizan las bacterias transformadas para confirmar que exhiben el nuevo comportamiento deseado. Los investigadores realizan ensayos, experimentos o pruebas fenotípicas para evaluar la adquisición exitosa del nuevo rasgo.
8. Optimización y ajuste:
- Si es necesario, los investigadores podrán realizar rondas iterativas de ingeniería genética, optimizando los niveles de expresión o elementos reguladores para conseguir el comportamiento deseado de forma más eficiente.
9. Estabilidad y mantenimiento:
- Los investigadores evalúan la estabilidad de las modificaciones genéticas introducidas a lo largo de múltiples generaciones de crecimiento bacteriano. Pueden aplicar técnicas como la activación de genes o la integración del genoma para garantizar la retención a largo plazo del nuevo rasgo.
10. Aplicaciones:
- Una vez que las bacterias exhiben con éxito el comportamiento deseado, pueden utilizarse para diversas aplicaciones, como biotecnología, medicina, remediación ambiental o procesos industriales.
Es importante tener en cuenta que enseñar a las bacterias nuevos comportamientos mediante la ingeniería genética requiere conocimientos especializados, experiencia de laboratorio y el cumplimiento de pautas de seguridad, ya que implica trabajar con organismos genéticamente modificados.
