Por Jack Brubaker
Actualizado el 30 de agosto de 2022
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En química analítica, el espectrómetro ultravioleta-visible (UV-Vis) es la herramienta estándar para cuantificar cuánta luz absorbe una muestra. La cantidad de absorción, capturada como absorbancia (A), depende de tres variables clave:la concentración de la muestra (c), la longitud del camino de la cubeta (l) y el coeficiente de absorción molar (ε), también conocido como coeficiente de extinción molar. La relación se expresa mediante la Ley de Beer:A=εcl . Para resolver cualquiera de estas variables, se deben conocer las otras tres.
Utilice el espectro de absorbancia producido por su instrumento UV-Vis. El espectro traza la absorbancia frente a la longitud de onda (nm). Los picos en el gráfico indican longitudes de onda donde el compuesto se absorbe con mayor fuerza; seleccione el pico que mejor se adapte a su objetivo analítico.
Determine la molaridad (M) de la solución con la fórmula:
M=(gramos de soluto) ÷ (peso molecular en gmol⁻¹) ÷ (litros de solución).
Por ejemplo, al disolver 0,10 g de tetrafenilciclopentadienona (PM =384 gmol⁻¹) en 1,00 l de metanol se obtiene:
M=0,10g ÷ 384gmol⁻¹ ÷ 1,00L=2,6×10⁻⁴M.
La longitud del camino óptico de la cubeta suele ser de 1,0 cm, aunque hay otras longitudes disponibles, especialmente para muestras gaseosas. La longitud del camino suele estar impresa en el espectro de absorbancia o en la propia cubeta.
Reorganice la ley de Beer para aislar ε:
ε=A ÷ (c×l)
Usando el ejemplo de la tetrafenilciclopentadienona:aparecen dos picos a 343 nm (A =0,89) y 512 nm (A =0,35). Con una cubeta de 1,0 cm y una concentración de 2,6×10⁻⁴M, los coeficientes son:
ε(343nm)=0,89 ÷ (2,6×10⁻⁴×1,0)≈3423Lmol⁻¹cm⁻¹
ε(512nm)=0,35 ÷ (2,6×10⁻⁴×1,0)≈1346Lmol⁻¹cm⁻¹
