Técnicas para observar uniones celulares
* Microscopía de luz:
* Microscopía de campo brillante: Si bien no es la microscopía de campo brillante más detallada puede proporcionar una vista básica de la forma de la celda y cómo están conectadas las células.
* Microscopía de contraste de fase: Esta técnica mejora el contraste dentro de la célula, lo que facilita ver los contornos de las uniones celulares.
* Microscopía de contraste de interferencia diferencial (DIC): DIC produce una imagen tridimensional casi holográfica, mejorando la visualización de las uniones celulares.
* microscopía electrónica (EM): Para detalles ultraestructurales:
* Microscopía electrónica de transmisión (TEM): TEM proporciona imágenes increíblemente de alta resolución. Las secciones delgadas de las células se tiñen con metales pesados, y los electrones que pasan a través de la arquitectura detallada de las uniones celulares.
* Microscopía electrónica de barrido (SEM): SEM crea una imagen 3D de la superficie de la celda, que muestra la morfología de las uniones celulares con más detalle.
Preparaciones específicas para estudiar las uniones celulares:
* Cultivo celular: Los científicos a menudo usan células cultivadas (cultivadas en un laboratorio) para estudiar las uniones celulares. Las células cultivadas son más fáciles de manipular y observar que las células en los tejidos.
* Preparación del tejido:
* fijación: Las células y los tejidos son tratados químicamente (fijos) para preservar su estructura y evitar la degradación.
* incrustación: El tejido fijo está integrado en un medio sólido como cera o resina para soporte durante la seccionamiento.
* seccionando: Las rodajas delgadas del tejido incrustado se cortan usando un microtomo, creando secciones que son lo suficientemente delgadas para la microscopía de luz o electrónica.
* tinción: Se utilizan tintes y manchas específicos para resaltar diferentes estructuras y componentes celulares, haciendo que las uniones celulares sean más visibles.
Tipos de uniones celulares para observar:
* uniones apretadas: Estas uniones forman un sello apretado entre las células, evitando el paso de fluidos y moléculas entre ellos.
* Adhesen Uniones: Estas uniones proporcionan una fuerte adhesión entre las células, que actúan como un "pegamento". Involucran proteínas como las cadherinas que unen las células.
* Desmosomas: Similar a las uniones adherentes, los desmosomas proporcionan una fuerte adhesión, pero son estructuras similares a las manchas que conectan los filamentos intermedios de las células adyacentes.
* uniones de brecha: Estas uniones actúan como canales que permiten la comunicación directa entre las células, los iones que pasan y las moléculas pequeñas.
Consideraciones importantes:
* Especificidad: Los científicos pueden usar anticuerpos que se unen específicamente a las proteínas encontradas en las uniones celulares. Esto permite la tinción dirigida y la visualización de tipos específicos de uniones.
* Preparación de muestras: La preparación adecuada de las células o tejidos es crucial para garantizar la integridad de las uniones celulares y obtener imágenes de alta calidad.
Experimento de ejemplo:
Un científico quiere estudiar cómo las uniones estrechas en el revestimiento intestinal se ven afectadas por un medicamento específico. Ellos podrían:
1. Cultivar células epiteliales intestinales en cultivo.
2. Trate algunas células con el fármaco y otras con una solución de control.
3. Arregle y prepare las células para la microscopía electrónica.
4. Analice las imágenes para comparar la estructura de las uniones estrechas en las células tratadas y no tratadas.
Al combinar técnicas y análisis apropiados, los científicos pueden obtener información valiosa sobre la estructura y función de las uniones celulares, que son esenciales para la organización y la comunicación de los tejidos.
