Aquí hay un desglose del proceso:
1. Aislamiento del gen:
* El gen deseado se identifica y se aísla del ADN del organismo donante utilizando enzimas de restricción. Estas enzimas cortan el ADN en secuencias específicas, liberando el gen de interés.
2. Construcción vectorial:
* Se elige un vector (a menudo un plásmido o un virus) para llevar el gen al organismo receptor.
* El gen aislado se inserta en el vector usando enzimas ligasa, que sella los hilos de ADN.
3. Transformación:
* El vector que contiene el gen se introduce en el organismo receptor (la célula huésped). Esto se puede hacer a través de varios métodos, incluidos:
* Electroporación: Aplicando un pulso eléctrico para crear poros temporales en la membrana celular, lo que permite que el vector ingrese.
* Transfección: Uso de productos químicos o virus para administrar el vector a la célula.
* Microinyección: Inyectar físicamente el vector directamente en la celda.
4. Selección y detección:
* Solo se seleccionan las células que han tomado con éxito el gen. Esto se puede lograr usando marcadores de resistencia a antibióticos u otros mecanismos de selección.
* Las células transformadas se examinan para confirmar que el gen se ha incorporado correctamente en el genoma del huésped y es funcional.
5. Expresión génica:
* Una vez que el gen se integra en el genoma de la célula huésped, se puede expresar, lo que lleva a la producción de la proteína deseada.
Aplicaciones de la clonación de genes:
* Producción de proteínas terapéuticas: Genes de clonación para insulina, hormona de crecimiento y otras proteínas importantes.
* Terapia génica: Reemplazo de genes defectuosos por los funcionales en pacientes con trastornos genéticos.
* Biotecnología agrícola: Introducción de genes para la resistencia a las plagas, la tolerancia a los herbicidas y el contenido nutricional mejorado en los cultivos.
* Investigación y desarrollo: Estudiar la función y la regulación génica.
La clonación de genes es una herramienta poderosa con aplicaciones generalizadas en medicina, agricultura e investigación.