Una unidad de electroforesis en gel vertical es un dispositivo utilizado en biología molecular y bioquímica para separar moléculas, principalmente proteínas y ácidos nucleicos (ADN y ARN) , basado en su tamaño y carga .
Aquí hay un desglose de sus características clave:
1. Componentes:
* bandeja de fundición de gel: Esto sostiene el gel, que es una matriz porosa que actúa como medio de separación.
* placas de vidrio: Dos placas de vidrio vertical side el gel, creando un canal estrecho para la migración de la muestra.
* Cámaras de búfer: Estos contienen el tampón de electroforesis, que lleva a cabo electricidad y mantiene el pH del sistema.
* electrodos: Un par de electrodos (ánodo y cátodo) generan un campo eléctrico que impulsa las moléculas a través del gel.
* Fuente de alimentación: Proporciona una corriente continua a los electrodos, creando el campo eléctrico para la separación.
* peine: Esto se usa para crear pozos en el gel, donde se cargan muestras.
2. Principio de trabajo:
* El gel generalmente está hecho de poliacrilamida (Página) o Agarose , con diferentes densidades para controlar el tamaño de los poros.
* Las muestras se cargan en pozos en la parte superior del gel.
* Cuando se aplica un campo eléctrico, las moléculas migran a través del gel hacia el electrodo con la carga opuesta (positivo para moléculas cargadas negativamente y viceversa).
* Las moléculas más pequeñas migran más rápido A través de los poros del gel, mientras que las moléculas más grandes encuentran más resistencia y se mueven más lentamente.
* Esto da como resultado bandas de separación Basado en el tamaño, con las moléculas más pequeñas en la parte inferior y las más grandes en la parte superior.
3. Aplicaciones:
* Análisis de proteínas: Determinar el tamaño de la proteína, la pureza y la presencia.
* Análisis de ADN: Secuenciación, análisis de polimorfismo de longitud de fragmento de restricción (RFLP) y clonación.
* Análisis de ARN: Evaluación de la expresión génica y el estudio de la estructura de ARN.
4. Ventajas:
* Alta resolución: Proporciona una separación clara de las moléculas con ligeras diferencias de tamaño.
* Versatilidad: Adecuado para varios tipos de muestras y aplicaciones.
* Análisis cuantitativo: La intensidad de la banda se puede usar para medir la cantidad de cada molécula.
5. Limitaciones:
* Configuración compleja: Requiere una preparación cuidadosa y atención al detalle.
* que consumen mucho tiempo: El proceso de electroforesis puede tomar varias horas.
* Capacidad limitada: El tamaño del gel restringe el número de muestras que se pueden ejecutar simultáneamente.
En general, la unidad de electroforesis en gel vertical es una herramienta esencial para los investigadores en varios campos, que proporciona información valiosa sobre la composición y las características de las moléculas biológicas.
