Por John Brennan
Actualizado el 30 de agosto de 2022
La técnica de placa abarrotada, iniciada por investigadores después del descubrimiento de la penicilina por parte de Fleming en 1928, sigue siendo una de las primeras y más accesibles estrategias para detectar microbios productores de antibióticos en muestras ambientales.
Una muestra de suelo o ambiental se diluye en serie en agua estéril y se extiende sobre placas de agar rico en nutrientes. Los científicos seleccionan placas que producen una alta densidad de colonias y luego inspeccionan las colonias en busca de zonas claras de inhibición alrededor de las colonias vecinas. Estas zonas indican que un microorganismo puede estar secretando un compuesto que suprime el crecimiento de sus vecinos.
Los productores sospechosos de antibióticos se siembran en placas frescas para lograr colonias puras. Los subcultivos posteriores confirman si la inhibición observada se debe a un compuesto antimicrobiano secretado o simplemente a un cambio en el pH local u otros factores ambientales. Luego, los aislados puros se cultivan en medios líquidos para su extracción y caracterización bioquímica.
Este enfoque es notablemente sencillo, requiere sólo equipo de microbiología estándar y puede producir resultados en dos o tres días. Permite una detección rápida de organismos de prueba, incluidos patógenos clínicamente relevantes, para evaluar el valor terapéutico potencial. La simplicidad del método lo hace ideal para pantallas preliminares de alto rendimiento en laboratorios académicos e industriales.
Debido a que el ensayo se basa en una inhibición visible, detecta solo compuestos que actúan rápidamente contra colonias cercanas, pasando por alto potencialmente agentes de acción más lenta o de espectro reducido. Los compuestos identificados pueden atacar a las bacterias del suelo pero no a los patógenos humanos, y algunos pueden ser tóxicos para las células humanas. Además, solo se capturan los microorganismos que comienzan a producir antibióticos dentro del corto período de incubación, lo que significa que los metabolitos de inducción tardía o condicionales permanecen ocultos.
