1. Llevar y replicar el ADN extranjero:
* origen de replicación (ori): Los vectores poseen un origen de la secuencia de replicación (ORI), lo que les permite replicarse independientemente dentro de la célula huésped, asegurando la multiplicación del fragmento de ADN insertado.
* Sitio de clonación múltiple (MCS): El MCS es una región que contiene una serie de sitios de reconocimiento de enzimas de restricción, donde el ADN extraño se puede insertar utilizando enzimas de restricción específicas.
2. Selección e identificación:
* Marcador seleccionable: Los vectores incorporan genes marcadores seleccionables, como los genes de resistencia a los antibióticos. Esto permite la selección de células que han absorbido con éxito el vector, ya que sobrevivirán en presencia del antibiótico.
* gen reportero: Los genes reporteros, como LacZ, permiten la fácil identificación de células que contienen el vector. Expresan una proteína detectable que proporciona una señal visual.
3. Expresión de ADN insertado:
* Señales de transcripción y traducción: Los vectores a menudo transportan promotores y otros elementos reguladores que aseguran la transcripción y traducción del gen insertado dentro de la célula huésped, lo que permite la expresión de proteínas.
4. Tipos de vectores específicos:
* plásmidos: Pequeñas moléculas de ADN circulares comúnmente utilizadas en la clonación. Se replican fácilmente dentro de las bacterias.
* Bacteriófagos: Los virus que infectan bacterias, que pueden modificarse para transportar ADN extraño.
* cosmids: Vectores híbridos que combinan características de plásmidos y bacteriófagos, que ofrecen una alta capacidad de clonación.
* cromosomas artificiales de levadura (YACS): Cromosomas Artificiales utilizados para clonar grandes fragmentos de ADN, típicamente encontrados en eucariotas.
En resumen:
Los vectores de clonación son vitales para la clonación y la manipulación de genes, proporcionando las herramientas esenciales para:
* Llevar y replicar el ADN extranjero.
* Selección e identificación de células que contienen el vector.
* habilitando la expresión del ADN insertado.
* Elegir el tipo de vector apropiado para la aplicación deseada.
Son cruciales para la investigación, la biotecnología y diversas aplicaciones, incluida la terapia génica, la producción de proteínas e ingeniería genética.
