Existen numerosos métodos empleados por los científicos para estudiar células, cada una con sus propias fortalezas y limitaciones. Estos métodos pueden clasificarse ampliamente en:
1. Microscopía:
* Microscopía de luz (LM):
* Microscopía de campo brillante: El tipo más básico, usa luz visible para iluminar la muestra. Bueno para observar la estructura celular básica.
* Microscopía de contraste de fase: Mejora el contraste al explotar las diferencias en el índice de refracción de las estructuras celulares. Excelente para observar células vivas sin manchar.
* Microscopía de contraste de interferencia diferencial (DIC): Similar al contraste de fase, pero produce una imagen más tridimensional.
* Microscopía de fluorescencia: Utiliza colorantes fluorescentes para etiquetar componentes de células específicos, lo que permite la visualización de estructuras específicas dentro de una célula.
* Microscopía confocal: Un tipo de microscopía de fluorescencia que utiliza láseres y agujeros para producir imágenes afiladas de alta resolución de secciones delgadas de células.
* Microscopía de súper resolución: Utiliza técnicas avanzadas para superar el límite de difracción de la luz, lo que permite la visualización de estructuras más pequeñas que la longitud de onda de la luz. Los ejemplos incluyen STED, Palm y Storm.
* microscopía electrónica (EM):
* Microscopía electrónica de transmisión (TEM): Utiliza un haz de electrones para generar una imagen de la estructura interna de las células. Proporciona imágenes de alta resolución, revelando detalles finos de orgánulos y moléculas.
* Microscopía electrónica de barrido (SEM): Produce imágenes tridimensionales de la superficie de las células y los tejidos.
2. Cultivo celular:
* Células en crecimiento in vitro: Permite el estudio controlado de células en un entorno de laboratorio. Se puede utilizar para estudiar el crecimiento celular, la diferenciación y la respuesta a varios estímulos.
* Cultivo de células primarias: Utiliza células directamente aisladas de un organismo. Proporciona una representación más precisa de las células en su entorno natural.
* líneas celulares inmortalizadas: Células que pueden dividirse indefinidamente en cultivo. Proporcionar una fuente estable y consistente de células para la investigación.
3. Técnicas bioquímicas y moleculares:
* Análisis de proteínas: Métodos como electroforesis, cromatografía y espectrometría de masas se utilizan para separar, identificar y cuantificar las proteínas.
* Análisis de ADN y ARN: Las técnicas como PCR, secuenciación y microarrays permiten el estudio de genes y su expresión.
* citometría de flujo: Utiliza láseres y anticuerpos fluorescentes para identificar y cuantificar diferentes poblaciones celulares en función de sus características.
* Clasificación de células: Permite el aislamiento de poblaciones celulares específicas de una población mixta basada en sus propiedades.
* Manipulación genética: Las técnicas como CRISPR-CAS9 permiten la edición de genes dirigidos, que proporcionan información valiosa sobre la función génica.
4. Otras técnicas:
* Cristalografía de rayos X: Utilizado para determinar la estructura tridimensional de las proteínas y otras moléculas.
* Espectroscopía NMR: Proporciona información sobre la estructura y la dinámica de las moléculas en solución.
* Microfluídica: Permite la manipulación y estudio de células en pequeños canales y cámaras.
* bioinformática: Utiliza métodos computacionales para analizar grandes conjuntos de datos de información biológica, incluidos los datos celulares.
Elegir el método correcto: La elección de la técnica depende de la pregunta de investigación específica que se está abordando y el tipo de célula que se está estudiando. A menudo es necesario usar una combinación de diferentes métodos para obtener una comprensión integral de la función celular.
