Unión de ácidos nucleicos :Las moléculas de EtBr tienen una estructura plana que les permite intercalarse entre las bases apiladas del ADN o ARN bicatenario. Este proceso de intercalación hace que las moléculas de ADN o ARN se vuelvan fluorescentes cuando se exponen a la luz ultravioleta.
Emisión de fluorescencia :Cuando EtBr se une a los ácidos nucleicos y se expone a la luz ultravioleta, absorbe la energía ultravioleta y emite luz visible en la región naranja-roja del espectro. Esta emisión de luz es la que permite la visualización de fragmentos de ADN o ARN durante la electroforesis en gel.
Sensibilidad :EtBr es muy sensible y con este colorante se pueden detectar incluso pequeñas cantidades de ácidos nucleicos. Esta sensibilidad es crucial para detectar y analizar muestras de ADN o ARN de baja concentración.
Detección y Visualización :Después de la electroforesis, el gel de agarosa que contiene los fragmentos de ADN o ARN separados se tiñe con una solución de EtBr. Luego, el gel se coloca bajo una fuente de luz ultravioleta, como un transiluminador. Las bandas de ácido nucleico teñidas con EtBr aparecen como bandas fluorescentes de color rojo anaranjado brillante sobre un fondo oscuro.
Documentación :Las bandas fluorescentes se pueden visualizar y documentar mediante fotografía o sistemas de imágenes digitales. Esto permite a los investigadores capturar y analizar los resultados de la electroforesis.
Sin embargo, es importante tener en cuenta que EtBr es un mutágeno potencial y puede causar daños a las células y al ADN. Por lo tanto, es esencial tomar precauciones de seguridad adecuadas y técnicas de manipulación adecuadas cuando se trabaja con EtBr.
En resumen, EtBr desempeña un papel vital en la electroforesis al unirse a ácidos nucleicos y permitir la visualización de fragmentos de ADN o ARN bajo luz ultravioleta. Su alta sensibilidad y emisión de fluorescencia lo convierten en un tinte ampliamente utilizado para detectar y analizar muestras de ácido nucleico en biología molecular e investigación genética.
