1. Análisis Morfológico :Esto implica examinar la línea celular bajo un microscopio para observar su forma, tamaño y características de crecimiento. Si bien el análisis morfológico puede resultar útil para identificar características generales de una línea celular, no siempre es suficiente para una autenticación definitiva.
2. Inmunofenotipado :Este método utiliza anticuerpos para detectar la presencia o ausencia de marcadores de superficie específicos o proteínas intracelulares que son características de un tipo de célula particular. La inmunofenotipificación se puede realizar mediante técnicas como la citometría de flujo o la inmunocitoquímica.
3. Cariotipo :Esta técnica implica analizar el número de cromosomas y la estructura de una línea celular. El cariotipo puede identificar anomalías o cambios cromosómicos que pueden indicar contaminación o identificación errónea.
4. Huellas dactilares de ADN :Este método implica analizar los patrones de ADN únicos de una línea celular utilizando técnicas como el perfil de repetición corta en tándem (STR) o el análisis de polimorfismo de un solo nucleótido (SNP). Las huellas dactilares de ADN pueden proporcionar un alto nivel de discriminación y se utilizan ampliamente para la autenticación de líneas celulares.
5. PCR específica de especie :Este método utiliza la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para amplificar secuencias de ADN específicas que son exclusivas de la especie de origen de la línea celular. La PCR específica de especie se puede utilizar para detectar contaminación cruzada o identificación errónea de líneas celulares.
6. Análisis de isoenzimas :Esta técnica implica analizar la movilidad electroforética de isoenzimas, que son variantes de enzimas que difieren en su estructura y función molecular. El análisis de isoenzimas se puede utilizar para identificar la contaminación de líneas celulares o una identificación errónea basada en diferencias en los patrones de isoenzimas.
7. Prueba de micoplasma :Los micoplasmas son un tipo de bacterias que pueden contaminar cultivos celulares y afectar su comportamiento y resultados experimentales. Las pruebas de micoplasma son esenciales para garantizar que las líneas celulares estén libres de contaminación por micoplasma.
Es importante tener en cuenta que la elección del método de autenticación depende de la línea celular específica y del nivel de autenticación requerido. Algunas líneas celulares pueden requerir múltiples métodos de autenticación para garantizar una identificación y un control de calidad confiables. Además, la documentación y el mantenimiento de registros adecuados del proceso de autenticación son cruciales para mantener la integridad de las líneas celulares y garantizar la reproducibilidad en la investigación.
