1. Enzimas:
* Nucleasas: Estas enzimas descomponen el ADN. Hay dos tipos principales:
* dnasas: Específicamente degradar el ADN.
* RNasas: Degradar el ARN, pero también puede escindir el ADN bajo ciertas condiciones.
* proteasas: Estas enzimas descomponen las proteínas, que pueden unirse al ADN y dificultar el aislado.
2. Polímeros:
* polisacáridos: Estos carbohidratos pueden formar geles pegajosos que atrapan el ADN. Los ejemplos incluyen glucógeno en células animales y almidón en células vegetales.
* proteínas: Como se mencionó, las proteínas pueden unirse al ADN y obstaculizar su extracción.
* lípidos: Las grasas y los aceites pueden interferir con la precipitación de ADN y dificultar la eliminación de la solución.
3. Otros componentes celulares:
* celulosa y lignina: Estos son componentes estructurales de las paredes celulares vegetales y pueden ser difíciles de eliminar, obstaculizando el aislamiento del ADN.
* metabolitos secundarios: Estos compuestos pueden ser producidos por plantas y animales e interferir con la extracción de ADN. Los ejemplos incluyen taninos, alcaloides y pigmentos.
* sales: Las altas concentraciones de sales pueden interrumpir la precipitación del ADN y obstaculizar su purificación.
4. Contaminación:
* ADN microbiano: El ADN de bacterias, hongos u otros microorganismos puede contaminar muestras.
* ADN ambiental: El ADN de fuentes como el suelo, el agua o el aire también pueden contaminar muestras.
Para abordar estos desafíos, los protocolos de extracción de ADN a menudo incluyen pasos que:
* células de lyse: Para romper la membrana celular y liberar el ADN.
* Enzimas inactivadas: A través del tratamiento térmico, inhibidores químicos o interrupción mecánica.
* Eliminar sustancias interferentes: A través de la filtración, precipitación u otros métodos.
* Purificar ADN: Uso de técnicas como precipitación de etanol o cromatografía de columna.
Es importante considerar el tipo específico de célula y la aplicación prevista al elegir un método de extracción de ADN apropiado.
