1. Medio de crecimiento: El agar LB proporciona un ambiente rico en nutrientes para que las bacterias crezcan y se multipliquen. Contiene nutrientes esenciales como triptona, extracto de levadura y cloruro de sodio, que respaldan el crecimiento y la división bacteriana.
2. Selección e identificación: Las placas LB pueden complementarse con antibióticos específicos, como ampicilina o kanamicina. Esto permite la selección de colonias bacterianas que se han transformado con un plásmido que contiene el gen de resistencia a los antibióticos. Solo las bacterias que transportan el plásmido sobrevivirán en la placa LB que contiene antibióticos, lo que permite la identificación de células transformadas con éxito.
En el proceso de fabricar células competentes, las placas LB se usan para:
* Bacterias en crecimiento: Las bacterias iniciales se cultivan primero en placas LB para obtener una gran cantidad de células.
* Selección de células transformadas: Después de la transformación, las bacterias se placan en placas LB que contienen el antibiótico apropiado. Solo las células transformadas que transportan el gen de resistencia crecerán, formando colonias.
Aspectos clave de las placas LB para hacer células competentes:
* Composición: El agar LB típicamente contiene 1% de triptone, 0.5% de extracto de levadura, 1% de NaCl y 1,5% de agar.
* Temperatura: Las placas LB generalmente se incuban a 37 ° C, la temperatura óptima para el crecimiento bacteriano.
* Selección de antibióticos: El antibiótico específico utilizado depende del plásmido que se usa para la transformación.
* Formación de colonias: Después de la incubación, las bacterias transformadas formarán colonias visibles en la placa LB, que luego se pueden analizar más a fondo.
En resumen: Las placas LB proporcionan un medio adecuado para el crecimiento bacteriano y permiten la selección de células transformadas basadas en la resistencia a los antibióticos. Son una herramienta esencial en el proceso de fabricar células competentes para la clonación de genes y otras técnicas de biología molecular.
