Las paredes celulares de las bacterias Gram positivas contienen una gruesa capa de peptidoglicano, un polisacárido complejo. Las paredes celulares de las bacterias Gram negativas, por otro lado, contienen una fina capa de peptidoglicano rodeada por una membrana externa.
El procedimiento de tinción de Gram implica la aplicación secuencial de una solución de cristal violeta, una solución de yodo, una solución de acetona-alcohol y una solución de safranina. El violeta cristal es el tinte principal que penetra las paredes celulares de bacterias Gram positivas y Gram negativas. Luego se añade yodo para formar un complejo con cristal violeta, mejorando aún más la tinción de las paredes celulares. La solución de acetona y alcohol actúa como agente diferenciador, provocando que las paredes celulares de las bacterias Gram-negativas se decoloren. Finalmente, se añade safranina como contratinción, tiñendo las paredes celulares decoloradas de las bacterias Gram-negativas.
La tinción de Gram generalmente no se aplica a los eucariotas debido a diferencias en las estructuras de sus paredes celulares. Los eucariotas, que incluyen hongos, plantas y animales, tienen paredes celulares compuestas principalmente de celulosa o quitina. Estos componentes de la pared celular no reaccionan con la tinción de Gram de la misma manera que lo hacen las paredes celulares de peptidoglicano de las bacterias. Como resultado, los eucariotas normalmente no retienen la tinción de Gram y aparecen incoloros cuando se observan al microscopio después de la tinción de Gram.
Otro motivo por el que la tinción de Gram no suele aplicarse a los eucariotas es que no es necesaria para su identificación y diferenciación. Los eucariotas se clasifican en diferentes grupos según su morfología, características genéticas y otras estructuras celulares específicas. Comúnmente se utilizan diferentes técnicas de tinción, como la tinción con hematoxilina y eosina, para visualizar y diferenciar las células eucariotas.
En resumen, la tinción de Gram se utiliza principalmente para la clasificación e identificación de bacterias en función de las estructuras de su pared celular. No se aplica comúnmente a eucariotas porque sus paredes celulares difieren de las de las bacterias y pueden identificarse eficazmente mediante métodos de tinción alternativos.
