1. Colección de ADN:
- Se extrae una pequeña muestra de células de un individuo, generalmente del interior de la mejilla, de la sangre u otros fluidos corporales.
- Luego la muestra se envía a un laboratorio para la extracción de ADN.
2. Extracción de ADN:
- La muestra celular pasa por un proceso de extracción de ADN para aislar y purificar el ADN.
- Este proceso implica romper las membranas celulares y eliminar proteínas y otro material celular.
- El resultado final es una muestra concentrada de ADN.
3. Amplificación de ADN:
- La muestra de ADN extraída es demasiado pequeña para el análisis directo, por lo que es necesario amplificarla para crear millones de copias de regiones específicas de ADN.
- Esto se hace mediante una técnica llamada reacción en cadena de la polimerasa (PCR).
- La PCR utiliza enzimas especializadas y ciclos de temperatura para realizar múltiples copias de las regiones de interés del ADN.
4. Electroforesis en gel:
- Los fragmentos de ADN amplificados se separan según su tamaño mediante una técnica llamada electroforesis en gel.
- Se colocan fragmentos de ADN en un gel de agarosa y se hace pasar a través de él una corriente eléctrica.
- Los fragmentos de ADN más pequeños se mueven más rápido a través del gel, mientras que los fragmentos más grandes se mueven más lentamente.
5. Visualización y Análisis:
- Después de la electroforesis, el gel se tiñe con un tinte especial que se une al ADN.
- Luego, los fragmentos de ADN se visualizan bajo una luz ultravioleta, creando bandas visibles en el gel.
- El patrón de bandas es único para cada individuo y se denomina perfil de ADN.
6. Comparación:
- El perfil de ADN de la muestra desconocida se compara con una muestra de referencia conocida, como una muestra de la escena de un crimen o una base de datos de ADN.
- Si los patrones de las bandas coinciden, sugiere que las muestras de ADN pertenecen al mismo individuo.
- Si hay diferencias en los patrones de bandas, indica que las muestras de ADN son de diferentes individuos.
7. Análisis estadístico:
- En los casos forenses, se realiza un análisis estadístico para determinar la probabilidad de que dos perfiles de ADN coincidan por casualidad.
- Se trata de calcular la frecuencia de las variaciones específicas del ADN (alelos) en la población.
- Una alta probabilidad de coincidencia proporciona una fuerte evidencia de que las muestras de ADN pertenecen al mismo individuo.
La elaboración de perfiles de ADN es una técnica poderosa ampliamente utilizada en diversos campos, incluida la ciencia forense, las pruebas de paternidad, el diagnóstico médico y la investigación genética. Proporciona identificación y análisis precisos y fiables de muestras de ADN, lo que la convierte en una herramienta esencial tanto en contextos científicos como legales.