Comprender la necesidad de un blanco/referencia
En espectroscopía (UV-vis, IR, etc.) o cromatografía, un blanco o referencia es crucial porque:
* corrige la absorbancia/interferencia de fondo: El disolvente en sí, la cubeta u otros componentes del sistema podrían absorber la luz a ciertas longitudes de onda. Un en blanco ayuda a eliminar estas señales de su medición, aislando la señal debido a su analito.
* Establece una línea de base: Una referencia establece un punto de partida para la comparación, lo que le permite medir con precisión los cambios en la absorbancia o la intensidad de la señal.
Elegir el blanco/referencia para al 80% de acetona/agua
* en blanco ideal: El blanco ideal es una solución que contiene * todo excepto el analito * en la misma concentración y sistema de solvente que su muestra. En este caso, el blanco sería el 80% de acetona en agua.
¿Por qué no agua pura?
* Absorción de acetona: La acetona tiene una absorbancia significativa en la región UV-VIS. El uso de agua pura como blanco resultaría en que sus mediciones se sesgen porque la acetona en su muestra contribuiría a la lectura de absorbancia, a pesar de que no es el analito.
Cómo preparar el blanco:
1. Use el mismo solvente: Prepare su blanco con la misma mezcla de acetona/agua al 80% que use para sus muestras.
2. Asegure la consistencia: Asegúrese de que el blanco sea el mismo volumen y temperatura que sus muestras para minimizar los errores.
3. Ejecute el blanco primero: Antes de medir sus muestras, ejecute el blanco a través del instrumento a "cero". Esto establece la línea de base.
Consideraciones adicionales:
* Interferencias de otros componentes: Si su muestra contiene componentes además del analito que absorben a la misma longitud de onda, es posible que necesite un enfoque más sofisticado como un método de adición estándar para corregir estas interferencias.
* Variaciones instrumentales: El instrumento específico que está utilizando puede tener sus propias pautas para la preparación y uso en blanco. Siempre consulte el manual del fabricante para obtener las mejores prácticas.
Ejemplo: Si está analizando una solución de un tinte en al 80% de acetona/agua, su blanco sería al 80% de acetona/agua * sin * el tinte. Esto le permite aislar la señal de absorbancia del tinte solo.
