Materiales:
1. agua desionizada
2. Dihidrogenofosfato de potasio (KH2PO4)
3. Hidrógenofosfato de sodio (Na2HPO4)
4. medidor de pH
5. Agitador magnético o barra agitadora
6. Matraz aforado (p. ej., 1000 ml)
7. Probeta o probeta graduada
Reactivos:
1. Solución de dihidrógenofosfato de potasio (KH2PO4) 0,2 M:disolver 17,41 g de KH2PO4 en 1000 ml de agua desionizada.
2. Solución de hidrogenofosfato de sodio (Na2HPO4) 0,2 M:disolver 28,48 g de Na2HPO4 en 1000 ml de agua desionizada.
Procedimiento:
1. Calcule los volúmenes de soluciones de KH2PO4 0,2 M y Na2HPO4 0,2 M necesarios para preparar 1000 ml de tampón fosfato 0,1 M a pH 7,5. Utilice la ecuación de Henderson-Hasselbalch:
pH =pKa + log ([A-]/[HA])
dónde:
- el pH es el pH deseado (7,5)
- pKa es la constante de disociación del ácido fosfórico (7.21)
- [A-] es la concentración de la base conjugada (Na2HPO4)
- [HA] es la concentración del ácido débil (KH2PO4)
Reordenando la ecuación y sustituyendo los valores:
log ([A-]/[HA]) =pH - pKa =7,5 - 7,21 =0,29
[A-]/[HA] =antilogaritmo (0,29) =1,959
A partir de la concentración de tampón deseada (0,1 M) y la relación calculada ([A-]/[HA]), determine los volúmenes de las soluciones de KH2PO4 0,2 M y Na2HPO4 0,2 M:
V (KH2PO4) =[HA] / [Concentración total] * Volumen total
=0,1 M / (0,1 M + 0,1 M) * 1000 ml
=500ml
V (Na2HPO4) =[A-] / [Concentración total] * Volumen total
=0,1 M / (0,1 M + 0,1 M) * 1000 ml
=500ml
2. Transfiera 500 ml de solución de KH2PO4 0,2 M a un matraz volumétrico de 1000 ml.
3. Agregue 500 ml de solución de Na2HPO4 0,2 M al matraz aforado.
4. Agite suavemente el matraz para mezclar las soluciones.
5. Verifique el pH del tampón usando un medidor de pH. Ajuste el pH a 7,5 agregando pequeños volúmenes de soluciones de KH2PO4 0,2 M o Na2HPO4 0,2 M según sea necesario.
6. Si es necesario, agregue agua desionizada para llevar el volumen final del tampón a 1000 ml.
7. Mezcle bien el tampón usando un agitador magnético o una barra agitadora.
Su tampón de fosfato 0,1 M de pH 7,5 ya está listo para usar. Guarde el tampón a la temperatura adecuada para sus condiciones experimentales.