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El cuerpo humano alberga aproximadamente nueve veces más células bacterianas que células humanas. En microbiología, un cultivo puro se refiere a una preparación de laboratorio, como una placa de Petri, que contiene una sola especie bacteriana. Identificar y aislar esa especie es esencial para una caracterización precisa y aplicaciones posteriores.
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Encienda un mechero Bunsen y pase el asa de inoculación a través de la parte más caliente de la llama hasta que se ponga roja. Este paso elimina los microbios residuales.
Deje que el bucle se enfríe durante unos 10 segundos y luego sumérjalo suavemente en la muestra microbiana.
Abra la placa de agar y deslice el bucle hacia adelante y hacia atrás a lo largo de aproximadamente un tercio de la superficie de la placa. Vuelva a esterilizar el asa en la llama.
Toque el asa con una región no inoculada del agar para enfriarlo. Gire la placa de modo que la sección inoculada quede a la izquierda o a la derecha, luego deslice el bucle a través del área inoculada y por el tercio superior de la superficie restante varias veces. Vuelva a esterilizar el asa.
Enfríe el asa en un área limpia del agar, gire la placa otros 90° y arrastre el asa a través de la zona previamente inoculada antes de barrer el área restante sin inocular.
Coloque la placa en una incubadora (o a temperatura ambiente) y espere hasta que aparezcan colonias visibles, normalmente de 24 a 48 horas o más, según el organismo.
Vuelva a esterilizar un nuevo asa de inoculación. Toque una única colonia bien formada en la placa y luego transfiérala a un tubo inclinado de agar o a un tubo de caldo nutritivo.
Incubar la inclinación o el caldo en las mismas condiciones que antes. Después de un crecimiento suficiente, el cultivo será una preparación bacteriana pura.
Rayar una placa en etapas sucesivas diluye la carga bacteriana, permitiendo que se formen colonias individuales. Evite la contaminación cruzada excesiva entre zonas de rayas. La incubación puede realizarse a temperatura ambiente, pero el uso de una incubadora controlada optimiza las condiciones de crecimiento del organismo específico.
Cuando se trabaja con microorganismos desconocidos, la seguridad es primordial:use guantes, esterilice minuciosamente las superficies después de la exposición y asegúrese de que el asa de inoculación esté esterilizada antes y después de cada paso.
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