Cuando se encuentra un aislado bacteriano no caracterizado, un enfoque sistemático que combina microscopía, cultivo y métodos moleculares es esencial para una identificación precisa.

1. Observar los rasgos físicos

Comience examinando la composición y la forma de la pared celular y cómo se unen las células después de la división. Estos atributos básicos proporcionan las primeras pistas sobre la taxonomía del organismo.

2. Aplicar la tinción de Gram

La tinción de Gram distingue las bacterias con paredes gruesas de peptidoglicano (grampositivas) de aquellas con paredes delgadas o ausentes (gramnegativas). Es la piedra angular de la clasificación bacteriana.

3. Examinar la morfología

• Cocos – células esféricas.
• Bacilos – varillas rectas.
• Cocobacilos – varillas cortas y ovaladas.
• Espirilla – rígido, en forma de espiral; siempre Gram-negativos.
• Espiroquetas – espirales flexibles y móviles; generalmente Gram-neutral.
• Vibrios – en forma de coma; Gram-negativos.

Tenga en cuenta que cada forma puede ser Gram positiva o Gram negativa, excepto las espirillas que son exclusivamente Gram negativas.

4. Evaluar los patrones de vinculación celular

Después de la división, los cocos y los bacilos forman disposiciones características:

• Diplococos/Diplobacilos – pares.
• Estreptococos/Estreptobacilos – cadenas.
• Tétradas – cuadrados de cuatro cocos.
• Sarcinae – cubos de ocho cocos.
• Estafilococos – racimos parecidos a uvas.

5. Cultura en medios selectivos

Inocular el aislado en una variedad de medios de crecimiento que favorezcan o inhiban grupos bacterianos específicos. Observe la morfología, el color y la tasa de crecimiento de la colonia para reducir las posibilidades.

6. Realizar pruebas bioquímicas

Busque subproductos metabólicos (p. ej., oxidasa, catalasa, fermentación de carbohidratos) para refinar aún más la identificación. Muchos laboratorios utilizan paneles automatizados para mayor velocidad y precisión.

7. Confirmar con secuenciación de ADN

Si los datos morfológicos y bioquímicos no son concluyentes, la secuenciación del ARNr 16S o el análisis del genoma completo pueden hacer coincidir definitivamente el aislado con una especie conocida o revelar una cepa nueva, siempre que existan genomas de referencia.

Por ejemplo, un aislado que es gramnegativo, aeróbico y forma cadenas de bastones rectas podría identificarse como Escherichia coli. después de la confirmación del cultivo y la secuenciación.

Serguéi Nazarov/iStock/GettyImages