1. Preparación de explantes:
* Selección del material fuente: Se selecciona material vegetal sano y libre de enfermedades, generalmente de los brotes apicales, segmentos de tallo o tejidos de hojas.
* esterilización: El material elegido se esteriliza usando desinfectantes como el lejía o el etanol para eliminar cualquier microbio contaminante.
2. Iniciación de la cultura:
* Colocación de explantes: El explante esterilizado se coloca en un medio de cultivo que contiene nutrientes y hormonas específicos, como auxinas y citoquininas. Este medio simula las condiciones necesarias para el crecimiento de la planta.
* ambiente estéril: El cultivo se mantiene en un entorno estéril, generalmente dentro de una cámara de crecimiento o incubadora, para evitar la contaminación.
3. Inducción y multiplicación de callos:
* Formación de callos: El explante se somete a la división celular, formando una masa de células indiferenciadas conocidas como callos. Esto a menudo se induce agregando hormonas específicas al medio de cultivo.
* multiplicación de callos: El callo está subcultado en medios frescos para aumentar su volumen.
4. Inducción de disparos:
* cambio hormonal: La concentración de hormona en el medio se ajusta para promover el desarrollo de brotes. Las citoquininas se usan típicamente para fomentar la formación de brotes.
* Desarrollo de disparos: Los brotes se desarrollan desde el callo, lo que resulta en un grupo de plántulas.
5. Inducción de raíz:
* cambio de hormona nuevamente: El medio se ajusta nuevamente para inducir la formación de la raíz. Esto generalmente implica aumentar la concentración de auxinas.
* Desarrollo de la raíz: Las raíces se desarrollan en las plántulas, preparándolas para el trasplante.
6. Aclimatización y trasplante:
* Endurecimiento: Las plántulas se aclimatan gradualmente a condiciones ambientales externas, como la luz solar, la humedad y la temperatura, transfiriéndolas a un invernadero o una cámara de crecimiento con una mayor exposición a estos factores.
* Trasplante: Una vez que las plántulas están suficientemente endurecidas, se trasplantan al suelo u otros medios de crecimiento.
Beneficios de cloning plantas de cultivo en cultivo de tejidos:
* Multiplicación rápida: Se pueden producir grandes cantidades de plantas idénticas rápidamente a partir de un solo explante, lo que permite una propagación eficiente.
* Plantas libres de enfermedad: El proceso elimina las enfermedades virales y otras presentes en el material vegetal original.
* Uniformidad genética: Todas las plantas clonadas son genéticamente idénticas, lo que lleva a características de plantas consistentes.
* Preservación de especies raras: Este método se puede utilizar para preservar y propagar especies de plantas en peligro o raras.
Limitaciones:
* Costo y experiencia: El cultivo de tejidos requiere equipos especializados, instalaciones estériles y personal capacitado, lo que lo convierte en un proceso costoso.
* Variación genética: Los clones son genéticamente idénticos, lo que limita su adaptabilidad a diferentes condiciones ambientales.
* Embriogénesis somática: En algunos casos, el proceso puede conducir a la formación de embriones somáticos, que podrían no desarrollarse en plantas normales.