El ARN total se refiere a la totalidad de las moléculas de ARN presentes en una muestra de células o biológicas . Abarca todos los tipos de ARN, incluidos:
* ARN de mensajero (ARNm): Lleva información genética del ADN a los ribosomas, donde se traduce en proteínas.
* ARN ribosómico (rRNA): Forma el núcleo estructural y catalítico de los ribosomas, la maquinaria de síntesis de proteínas.
* ARN de transferencia (TRNA): Transporta aminoácidos específicos a ribosomas durante la síntesis de proteínas.
* ARN nuclear pequeño (snRNA): Involucrado en el empalme, el proceso de eliminación de intrones del ARNm.
* ARN nucleolar pequeño (Snorna): Involucrado en la biogénesis del ribosoma y la modificación de rRNA.
* microARNA (miRNA): Regula la expresión génica uniéndose al ARNm e inhibiendo la traducción.
* ARN no codificante largo (lncRNA): Las moléculas de ARN no codificantes que pueden regular la expresión génica, contribuyen a la remodelación de la cromatina y tienen otras funciones.
* Otros ARN no codificantes: Varios otros tipos de moléculas de ARN con diversos roles.
Importancia del ARN total:
El ARN total es esencial para comprender los procesos celulares e identificar los posibles biomarcadores de enfermedades. Analizar el ARN total puede proporcionar información sobre:
* Expresión del gen: Determinar qué genes están activos en una célula o tejido en condiciones específicas.
* Función celular: Comprender los procesos celulares involucrados en la salud y la enfermedad.
* Diagnóstico de enfermedad: Identificación de firmas de ARN específicas de la enfermedad para la detección y diagnóstico temprano.
* Descubrimiento de drogas: Identificación de posibles objetivos fármacos analizando patrones de expresión de ARN.
Desafíos en el estudio de ARN total:
* degradación de ARN: El ARN es altamente inestable y susceptible a la degradación, lo que hace que sea difícil aislar y analizar.
* heterogeneidad de ARN: La abundancia de diferentes tipos de ARN en el ARN total puede dificultar estudiar transcripciones específicas.
* Preparación de la muestra: Los métodos adecuados de manejo de muestras y extracción de ARN son cruciales para obtener resultados precisos.
Herramientas y técnicas para estudiar ARN total:
* Extracción de ARN: Técnicas como la extracción de trizol o tiocianato-fenol-fenol-cloroformo de guanidinio se utilizan para aislar el ARN total de células o tejidos.
* secuenciación de ARN (RNA-seq): Tecnología de secuenciación de alto rendimiento utilizada para analizar el contenido de ARN completo de una muestra.
* Microarrays: Técnica basada en hibridación utilizada para medir los niveles de expresión de miles de genes simultáneamente.
* PCR en tiempo real (QPCR): Técnica sensible utilizada para cuantificar transcripciones de ARN específicas.
Conclusión:
El ARN total es un componente crucial de la función celular y una herramienta valiosa para la investigación y las aplicaciones clínicas. El estudio de ARN total proporciona información sobre la expresión génica, los procesos celulares y los mecanismos de la enfermedad. Comprender los diferentes tipos de ARN, los desafíos asociados con el análisis total de ARN y las tecnologías disponibles es esencial para investigadores y médicos que trabajan en varios campos.