1. Examen y preparación:
- Abrir con cuidado el paquete de hongos comerciales, conservando cualquier información del embalaje que pueda dar pistas sobre el origen o procedencia de los hongos.
- Retirar con cuidado los hongos del embalaje, teniendo cuidado de no dañar las estructuras delicadas.
- Prepare los hongos para un examen detallado limpiando suavemente la suciedad o los residuos con un cepillo suave.
2. Examen Morfológico:
- Utilice una lupa o un microscopio para observar de cerca las características morfológicas de los hongos, entre ellas:
- Forma y tamaño del cuerpo fructífero.
- Presencia y color de sombrero, tallo y branquias.
- Textura de las superficies de la tapa y del tallo.
- Color de la impresión de esporas.
3. Análisis microscópico:
- Prepare portaobjetos microscópicos de estructuras importantes como morfología de esporas, basidios, cistidios, hifas y cualquier otra estructura distintiva.
- Utilice colorantes especializados, como azul de algodón de lactofenol o reactivo de Melzer, para realzar componentes celulares específicos y facilitar la observación.
4. Extracción de ADN:
- Siguiendo las instrucciones del fabricante, extraiga el ADN genómico de una pequeña muestra de los hongos utilizando un kit de extracción de ADN disponible comercialmente.
5. Amplificación por PCR:
- Diseñar cebadores para regiones específicas del ADN, como la región espaciadora transcrita interna (ITS), que se usa comúnmente para la identificación de hongos.
- Realizar la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) utilizando el ADN extraído y los cebadores diseñados.
6. Secuenciación de ADN:
- Purificar los productos de PCR y enviarlos para secuenciación Sanger, que proporciona la secuencia de ADN de la región objetivo.
7. Búsqueda BLAST y análisis de datos:
- Comparar la secuencia de ADN obtenida con secuencias de hongos conocidas utilizando la base de datos de la herramienta de búsqueda de alineación local básica (BLAST).
- Analizar las similitudes de secuencia y cualquier información taxonómica disponible para determinar si los hongos coinciden con especies conocidas o si representan una especie no descrita.
8. Análisis filogenético:
- Si los hongos muestran una divergencia significativa con respecto a especies conocidas, realizar un análisis filogenético para inferir su relación evolutiva con otras especies descritas.
9. Descripción taxonómica:
- A partir de los análisis morfológicos, microscópicos y moleculares, elaborar una descripción taxonómica detallada de los hongos. Esto incluye:
- Nombre del género y especie (si no está descrito)
- Descripción detallada de las características morfológicas.
- Características de la secuencia de ADN.
- Ubicación geográfica y información de hábitat.
- Posible importancia ecológica
10. Publicación:
- Enviar la descripción taxonómica a una revista científica o base de datos relevante, junto con imágenes y datos de respaldo, para la publicación formal y el reconocimiento de la nueva especie.
Combinando el examen morfológico, el análisis microscópico, las técnicas moleculares y la experiencia taxonómica, es posible identificar y describir rápidamente especies no descritas que se encuentran en un paquete de hongos comerciales. Esto contribuye a nuestra comprensión de la diversidad de hongos y proporciona información valiosa para estudios ecológicos, esfuerzos de conservación y el avance del conocimiento micológico.
