Desarrollo de una nueva prueba de tira inmunocromatográfica de flujo lateral basada en nanocuerpos para la detección rápida de interferón α2b humano recombinante. Crédito:Diario de Análisis Farmacéutico
Los interferones son proteínas que constituyen una parte importante de nuestros sistemas de defensa naturales. Estas proteínas también exhiben una notable actividad antiviral. El interferón humano recombinante α2b (rhIFNα2b) fue aprobado por la Administración de Drogas y Alimentos de los EE. UU. en 1986. Desde entonces, se ha utilizado como agente antiviral para el tratamiento de la hepatitis B y la hepatitis C. Sin embargo, a pesar de sus aplicaciones generalizadas, sigue existiendo una Problema:la detección de rhIFNα2b es tediosa y requiere mucho tiempo.
En este contexto, investigadores de China, en un nuevo estudio, desarrollaron recientemente un método novedoso para la detección rápida y eficiente de rhIFNα2b. Este documento estuvo disponible en línea el 8 de julio de 2021 y se publicó en el Journal of Pharmaceutical Analysis el 30 de abril de 2022.
Para desarrollar su nuevo método, inmovilizaron un nuevo nanocuerpo en una tira de papel. El nanocuerpo utilizado en este método se derivó originalmente de una alpaca, una especie de mamífero camélido sudamericano. Posteriormente, se generó en el laboratorio de investigación mediante tecnología de ADN recombinante, técnica que se utiliza para subclonar fragmentos de ADN con el fin de obtener altas cantidades de proteínas sintéticas. Esto generalmente se logra utilizando bacterias u otras células procariotas. Un nanocuerpo es un fragmento funcional de un anticuerpo más grande. Dado que el nuevo nanocuerpo inmovilizado se une a rhIFNα2b de forma estrecha y con alta especificidad, se utilizó para una detección rápida e infalible de rhIFNα2b.
Según el Dr. Junzhi Wang, "Debido a las ventajas de los nanocuerpos en la preservación, producción y costo de los reactivos, el ensayo de inmunocromatografía de flujo lateral que utiliza nanocuerpos tiene un alto potencial para reemplazar los ensayos tradicionales de unión de ligandos basados en anticuerpos para una prueba de identificación rápida de terapias de proteínas recombinantes".
El equipo de investigación caracterizó la unión de la interacción I22-rhIFNα2b, es decir, la unión entre el nanocuerpo 122 y el rhIFNα2b, utilizando una plataforma Octet. Los datos obtenidos indicaron claramente una fuerte unión. La especificidad de unión se validó aún más mediante transferencia Western, una técnica utilizada para detectar proteínas mediante anticuerpos específicos de proteínas.
"Los productos de rhIFNα2b actualmente disponibles en China incluyen inyecciones, polvos para inyección, geles y pastas. Las tiras de inmunocromatografía solo se pueden usar para evaluar líquidos o productos en forma de polvo que se pueden disolver y aplicar a las tiras. Esto se debe a que el producto necesita difundir a lo largo de la tira a través de la acción capilar; los geles y las pastas no satisfacen este requisito", explica el Dr. Wang.
Curiosamente, el ensayo de detección de rhIFNa2b desarrollado tiene un límite de detección de 1 µg/ml, que es inferior a los límites existentes. Esto la convierte en una técnica de laboratorio más sensible para la identificación rápida de rhIFNα2b. Otra gran ventaja es el uso de nanocuerpos para la detección de proteínas. Esto se debe a que los nanocuerpos se pueden obtener de manera económica recolectando células bacterianas económicas. Además, se pueden obtener grandes volúmenes de nanocuerpos con relativa facilidad utilizando las técnicas de laboratorio habituales.
El Dr. Wang dice:"El tiempo de operación de la identificación de rhIFNα2b se redujo de dos días a unos pocos minutos con nuestra prueba. Por lo tanto, puede satisfacer las necesidades de detección rápida de esta familia de productos de proteínas recombinantes en el mercado y proporcionar una buena base para mejorar la eficiencia de la detección de falsificaciones en el mercado. En el futuro, la detección rápida podría llevarse a cabo de manera integral".
En resumen, el método recientemente desarrollado podría allanar el camino para una detección más suave, rápida y precisa de proteínas recombinantes o generadas artificialmente, lo que permitiría un diagnóstico y tratamiento tempranos de la hepatitis. Los conjugados de nanocuerpos y fármacos secuestran la ruta de absorción de la vitamina B12 humana