La cromatografía es una técnica analítica fundamental que separa los componentes de una mezcla. La métrica clave que cuantifica qué tan lejos viaja un compuesto durante este proceso es el factor de retención, comúnmente abreviado como Rf. .
Todos los métodos cromatográficos se basan en una fase estacionaria que permanece fija y una fase móvil que se mueve sobre él. En la cromatografía en papel, el papel en sí es la fase estacionaria, mientras que el disolvente actúa como fase móvil.
Para comenzar, se coloca un pequeño punto de la muestra cerca del borde inferior del papel. Luego, el papel se coloca en un vaso de precipitados poco profundo que contiene el disolvente, asegurándose de que el disolvente no sumerja la mancha de muestra. La acción capilar empuja el disolvente hacia arriba, arrastrando consigo cualquier componente que tenga mayor afinidad por la fase móvil.
Una vez que el frente del disolvente ha avanzado, se produce un cromatograma. Esta imagen revela la distribución de los componentes de la muestra y puede usarse para identificar sustancias desconocidas.
Cuando los cromatogramas se desarrollan en condiciones idénticas, la distancia que recorre una sustancia determinada es reproducible. El factor de retención se calcula como:
Rf =(distancia recorrida por la sustancia) ÷ (distancia recorrida por el frente del solvente)
El valor Rf resultante es una propiedad característica del compuesto para el sistema disolvente específico y la fase estacionaria empleada.
Suponga que tiene tres estándares puros y una mezcla desconocida. Al ejecutar cada estándar en el mismo cromatograma, se establecen valores Rf de referencia para comparar.
En este ejemplo, el frente del disolvente viajó 5,7 cm. Los estándares se movieron de la siguiente manera:
Después de analizar la mezcla desconocida, se observan dos puntos distintos. El frente del disolvente en este recorrido se movió 4,5 cm y las manchas viajaron 2,2 cm y 3,9 cm, respectivamente. Calcular sus valores Rf da:
La comparación de estos valores con los estándares sugiere que el Componente1 coincide con el Estándar3 (Rf≈0,51) y el Componente2 coincide con el Estándar2 (Rf≈0,84).
Al aprovechar valores de Rf consistentes, puede identificar con confianza los componentes de mezclas complejas, una práctica ampliamente adoptada en laboratorios de todo el mundo.
