1. Cromatografía de adsorción:
* Principio: Este método se basa en las diferentes afinidades de los componentes para la fase estacionaria (generalmente un adsorbente sólido como el gel de sílice o la alúmina). Los componentes que se unen más fuertemente a la fase estacionaria se mueven más lentamente a través de la columna.
* Ejemplos:
* cromatografía en columna: Una columna vertical llena con la fase estacionaria. La mezcla se aplica en la parte superior, y la fase móvil (líquido o gas) fluye, separando los componentes.
* cromatografía de capa delgada (TLC): Una capa delgada de adsorbente está recubierta en una placa. La mezcla se ve en la parte inferior, y la fase móvil se mueve por la placa por acción capilar, separando los componentes.
2. Cromatografía de partición:
* Principio: Este método explota las diferentes solubilidades de los componentes en dos fases inmiscibles (la fase estacionaria y la fase móvil). Los componentes que son más solubles en la fase estacionaria se moverán más lentamente.
* Ejemplos:
* cromatografía de gases (GC): La fase estacionaria es un líquido no volátil recubierto con un soporte sólido, y la fase móvil es un gas inerte. Esto se usa para separar compuestos volátiles.
* cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC): Utiliza una bomba de alta presión para forzar la fase móvil a través de una columna empaquetada que contiene la fase estacionaria (generalmente un líquido). Esto es adecuado para separar una amplia gama de compuestos.
3. Cromatografía de intercambio iónico:
* Principio: Este método utiliza grupos funcionales cargados en la fase estacionaria para unir iones de carga opuesta de la mezcla. Se separan diferentes iones con diferentes afinidades para la fase estacionaria.
* Ejemplos:
* cromatografía de intercambio de cationes: Utiliza una fase estacionaria cargada negativamente para unir cationes.
* cromatografía de intercambio de aniones: Utiliza una fase estacionaria cargada positivamente para unir aniones.
4. Cromatografía de exclusión por tamaño (SEC):
* Principio: Este método separa las moléculas en función de su tamaño. La fase estacionaria tiene poros de tamaños específicos. Las moléculas más grandes no pueden ingresar a los poros y pasar a través de la columna más rápido, mientras que las moléculas más pequeñas pueden ingresar a los poros y moverse más lento.
* Ejemplos:
* cromatografía de filtración de gel: Utiliza una matriz de gel como fase estacionaria.
* cromatografía de permeación de gel (GPC): Utiliza un polímero poroso como fase estacionaria.
5. Cromatografía de afinidad:
* Principio: Este método utiliza una interacción altamente específica entre un componente en la mezcla y un ligando inmovilizado en la fase estacionaria. Esto permite una separación altamente selectiva.
* Ejemplos:
* cromatografía de inmunoafinidad: Utiliza anticuerpos como ligandos para unirse y separar proteínas específicas.
* cromatografía de afinidad metálica: Utiliza iones metálicos como ligandos para unirse y separar proteínas con sitios de unión a metales específicos.
nota: La elección específica del método de cromatografía depende de la naturaleza de la mezcla, la separación deseada y las propiedades de los compuestos. Cada método tiene sus propias ventajas y desventajas, y la elección a menudo requiere una consideración cuidadosa.
