El agar es una sustancia similar a la gelatina derivada de las paredes celulares purificadas de las algas rojas. Se agrega a medios microbiológicos, que son materiales sobre los que se cultivan microorganismos en laboratorios, para proporcionar una estructura sólida a la sustancia. El agar no tiene ningún valor nutricional, por lo que cuando los científicos lo utilizan para cultivar microorganismos, agregan varios nutrientes para aumentar el crecimiento bacteriano en placas de Petri o tubos de ensayo. Cuando los investigadores almacenan bacterias en un tubo de ensayo, se conoce como agar inclinado porque el medio de crecimiento líquido se solidifica mientras el tubo está en una posición inclinada. Un tapón de rosca en la parte superior evita que el agar se seque.
Preparación media
El medio se prepara de forma diferente para las incisiones que las placas de Petri. La esterilización se realiza con el agar en los tubos; Las placas de Petri se esterilizan previamente antes de verter en ellas el agar esterilizado. Mida la cantidad de agua necesaria y colóquela en un matraz Erlenmeyer. Caliéntelo en una estufa hasta que esté casi hirviendo. Agregue otros ingredientes si es necesario y mezcle la mezcla lenta y constantemente hasta que se disuelva. Estos ingredientes pueden incluir extractos de carne, peptona y tampones de pH, dependiendo del tipo de microorganismo que se está cultivando.
Agregue Agar
Antes de agregar el polvo de agar deshidratado, mezcle con una pequeña cantidad de agua destilada fría para evitar el agrupamiento. Tenga cuidado al agregar agar al líquido caliente ya que puede formar espuma y desbordar la olla. Agregue pequeñas cantidades de agar a la vez y revuelva para distribuir uniformemente el agar. Apague el fuego cuando la mezcla comience a hervir, antes de que hierva.
Tubos de esterilización
Coloque los tubos de prueba sin tapar en un estante para tubos de ensayo. Llene los tubos de prueba transfiriendo aproximadamente 5 mililitros - aproximadamente 0.17 onzas o 1 cucharadita - del agar fundido de la olla usando una pipeta estéril. Tape sin apretar cada uno de los tubos de ensayo, ya que el agar no se esterilizará si están sellados herméticamente. Esterilice todos los tubos en un autoclave durante aproximadamente 25 minutos a 121 grados Celsius, o 250 grados Fahrenheit.
Almacene en una posición inclinada
Cuando el agar esté todavía caliente, incline con cuidado el estante que sostiene los tubos de ensayo sobre una superficie sólida o un libro grueso, asegurándose de que el medio dentro de los tubos esté en una posición inclinada con respecto a los tubos de ensayo. Permita que el medio se enfríe y se solidifique en este ángulo, lo que aumenta la superficie del agar. Apriete las tapas de los tubos de ensayo después de que el agar se haya enfriado. Los sesgos están listos para su uso una vez que el agar se ha solidificado. Se pueden almacenar a temperatura ambiente o en el refrigerador para su uso futuro.
Inocular el Slant
Inocular la inclinación transfiriendo células con un asa de inoculación de un microorganismo de una sola colonia en un plato a la superficie inclinada. Mueva el lazo a través de la superficie de la inclinación y vuelva a tapar los tubos. Incube la inclinación hasta que haya evidencia de crecimiento, luego coloque el tubo en el refrigerador.
