En el tratamiento de tumores, el microambiente juega un papel importante. A menudo contiene células inmunitarias que están tan cambiadas que promueven el crecimiento del tumor. En el diario Angewandte Chemie , Los científicos han introducido un método mediante el cual las muestras de células de los tumores y sus alrededores pueden reciclarse rápidamente (en menos de 1 hora) a través de la tinción. decoloración, y luego re-tinción con anticuerpos fluorescentes, a través de la unión de un "extintor de agujeros negros" (extintor de fluorescencia) por medio de "química de clic".

Para combatir un tumor de forma eficaz y precisa, Es importante caracterizar específicamente no solo las células del tumor sino también las de su microambiente, incluidas las células inmunitarias que se infiltran en el tumor. Hasta ahora, Los análisis de estos cambios dinámicos con biopsias convencionales y cortes de tejido podrían llevar días o semanas. o no ocurrir en absoluto antes del tratamiento. Un método alternativo es la aspiración con aguja fina, en el que solo se extraen unos pocos miles de células de diferentes partes de un tumor y sus alrededores. Este método tiene pocos riesgos y es más rápido porque no requiere incrustarlo ni seccionarlo. Sin embargo, para obtener una estimación representativa de las poblaciones de células inmunitarias en el microambiente del tumor, se deben realizar muchas tinciones diferentes. Debido a que la cantidad de celdas es tan pequeña, esto significa que la misma muestra debe teñirse repetidamente, desteñido y manchado de nuevo. Sin embargo, las células son demasiado delicadas para las convencionales, fuerte decoloración, y los procedimientos tardarían demasiado.

Un equipo dirigido por Jonathan Carlson y Ralph Weissleder en el Instituto de Investigación del Hospital General de Massachusetts y la Escuela de Medicina de Harvard (Boston, MAMÁ, EE. UU.) Ha desarrollado un sistema ultrarrápido altamente eficiente, y un método cíclico suave para el perfil de proteínas multiplexado de células individuales, lo que permite numerosas tinciones diferentes. En lugar de separar el tinte o blanquearlo, la fluorescencia de la mancha simplemente se "apaga" con un extintor de agujeros negros. Los extintores de agujeros negros absorben la energía de un tinte de fluorescencia en todo el espectro visible y lo convierten en calor tan pronto como se acercan lo suficiente. Esto apaga el brillo del tinte.

El método es el siguiente:utilizando un conector que contiene un grupo trans-cicloocteno, se une un tinte fluorescente a los anticuerpos que reconocen específicamente las moléculas marcadoras características de las células. Si el marcador de destino está en una muestra determinada, el anticuerpo se une a él y se puede detectar la fluorescencia. Luego se agrega el extintor que lleva un grupo tetrazina. Usando este grupo tetrazina y el trans-cicloocteno, el extintor se puede conectar simplemente "haciendo clic" en él como con un chasquido (de ahí el término química de clic para este tipo de reacción). Por lo tanto, el extintor se acerca al tinte de manera específica y muy rápida y eficiente. apagando inmediatamente su fluorescencia. La rapidez de esta reacción de clic es notable, ejecutando órdenes de magnitud más rápido de lo esperado. La razón de esto puede ser la fuerte interacción entre el tinte de fluorescencia y el extintor.

El siguiente anticuerpo fluorescente se puede aplicar inmediatamente después de la extinción de la fluorescencia. Los investigadores pudieron teñir doce moléculas marcadoras diferentes en una muestra en una hora. Esto permite caracterizar rápidamente las poblaciones de células inmunes en los tumores para seleccionar los tratamientos más adecuados.