FerriTagging de una proteína llamada HIP1R en fosas recubiertas de clatrina. El marcado de HIP1R se puede rastrear mediante microscopía óptica y microscopía electrónica. La ubicación de la ferritina se muestra mediante puntos rojos en el pozo. Crédito:Universidad de Warwick
Los científicos de la Universidad de Warwick han creado una nueva forma de ver las proteínas que se encuentran dentro de las células humanas.
Usando ferritina, una gran capa de proteína que nuestras células usan para almacenar hierro, los investigadores han encontrado un método que han llamado FerriTag que permite a un microscopio electrónico (EM) ver las proteínas de manera precisa a diferencia de los métodos actuales. El método permitió a los científicos permitir que la célula hiciera la etiqueta por sí misma evitando el daño causado al colocarla desde el exterior de la célula.
Su artículo FerriTag es una nueva etiqueta inducible codificada genéticamente para microscopía electrónica de luz correlativa se publica en la revista Comunicaciones de la naturaleza .
El equipo se propuso localizar con precisión una proteína que se encuentra en fosas recubiertas de clatrina. Estos son puntos de entrada de 100 nm de ancho que utilizan los virus para invadir células e infectarlas. Usando FerriTag, el equipo pudo ver dónde se encuentra la proteína en el pozo y en la cara interior de la superficie de la célula.
El equipo fue dirigido por el Dr. Stephen Royle, profesor asociado e investigador principal del Reino Unido en Investigación del Cáncer en la Escuela de Medicina de Warwick. Dijo:"Las proteínas hacen casi todos los trabajos en las células que los científicos quieren estudiar. Podemos aprender mucho sobre cómo funcionan las proteínas simplemente observándolas con el microscopio. Pero necesitamos saber su ubicación precisa".
Aunque se puede utilizar la microscopía óptica para ver cómo se mueven las proteínas, la resolución es baja, por lo que es imposible ver la ubicación precisa de una proteína. Esto puede superarse mediante el uso de microscopía electrónica que proporciona una resolución más alta.
Para permitir que las proteínas sean vistas por ambos microscopios y correlacionarlas, El equipo de investigación desarrolló un método para marcar las proteínas para que puedan ser vistas por ambos tipos de equipos.
El etiquetado se usa ampliamente y hay varias etiquetas disponibles, sin embargo, han establecido inconvenientes; algunos no son lo suficientemente precisos, o no funcionan con proteínas individuales. Para superar esto, el laboratorio del Dr. Royle creó una nueva etiqueta y la fusionó con una proteína fluorescente. El equipo del Dr. Royle nombró a la nueva técnica FerriTag porque se basa en ferritina que se puede ver con un microscopio electrónico porque el hierro dispersa los electrones.
El Dr. Royle dijo que su laboratorio tuvo que vencer otro obstáculo:"Cuando la ferritina se fusiona con una proteína, terminamos con una papilla. Entonces, Alteramos la ferritina para que pudiera unirse a la proteína de interés mediante el uso de un fármaco.
"Esto significaba que podíamos poner el FerriTag en la proteína que queremos obtener en unos pocos segundos.
"Lo bueno de FerriTag es que está codificado genéticamente. Eso significa que conseguimos que la célula haga la etiqueta por sí misma y no tenemos que colocarla desde fuera, lo que dañaría la célula".