Sangre seca en papel de filtro almacenada para futuros fines de diagnóstico, considerablemente más fácil que en la actualidad, método que consume recursos utilizando muestras de sangre congeladas en tubos de plástico. En un nuevo estudio, Los investigadores de Uppsala han medido con éxito 92 proteínas diferentes en círculos de tamaño milimétrico extraídos de muestras secas. Han demostrado que este método tiene un gran potencial para ahorrar recursos, en beneficio de un diagnóstico y tratamiento tempranos.

Las muestras de sangre almacenadas son de suma importancia para encontrar marcadores de enfermedades que puedan usarse para la detección temprana de enfermedades. cuando todavía son curables. Hoy dia, Los tubos de ensayo que contienen volúmenes relativamente grandes (mililitros) de plasma sanguíneo se mantienen en grandes congeladores que consumen mucha energía a -80 ° C. Un paciente debe ir primero a una unidad de salud donde una enfermera capacitada obtiene una muestra de sangre venosa. que se envía a un laboratorio para la separación centrífuga de plasma. Luego, la muestra se puede analizar y / o guardar en un biobanco para estudios futuros. Este método que consume recursos significa, por ejemplo, que el Hospital Universitario de Uppsala ahorra actualmente solo el 1% de todas las muestras en un biobanco, mientras que el resto se descarta tras un análisis inicial.

El nuevo método podría cambiar radicalmente esta situación y tener un valor crucial para el desarrollo de la atención sanitaria futura. El estudio muestra que muy poco les sucede a las proteínas cuando se dejan secar. En muchos casos, permanecen completamente inalteradas después de 30 años, o cambiar solo mínimamente. Como consecuencia, las muestras secas podrían utilizarse para los controles de rutina de los servicios de salud. Estos podrían realizarse en el sector de servicios de laboratorio de rápido crecimiento, permitir que se investigue el estado de salud de las personas sin recurrir a servicios médicos y sanitarios. Las muestras también podrían utilizarse para crear biobancos a gran escala. Los costes en el sector sanitario se hundirían, se podrían analizar más muestras y se podría ahorrar una alta proporción de todas las muestras de sangre tomadas.

"Esto tiene varias implicaciones. Primero, puede pincharse el dedo y enviar una gota de sangre seca por correo. Segundo, a un costo mínimo, será posible construir biobancos gigantes de muestras obtenidas de forma clínica rutinaria. Esto significa que se pueden tomar muestras antes del inicio clínico de una enfermedad, identificar marcadores de valor para el diagnóstico precoz, mejorar el alcance del tratamiento curativo, "dice Ulf Landegren, Catedrático de Medicina Molecular y responsable del grupo de investigación Molecular Tools.

En el presente estudio, los científicos analizaron manchas de sangre seca (DBS). Algunos se habían recopilado recientemente, mientras que otros se han conservado durante hasta 30 años en biobancos en Suecia y Dinamarca que almacenan muestras de ECP tomadas de todos los recién nacidos para la detección de unos 20 trastornos metabólicos congénitos. Estos dos biobancos mantienen su DBS a diferentes temperaturas:el sueco a + 4 ° C y el danés a −24 ° C. Las muestras se utilizaron para analizar niveles de 92 proteínas relevantes en oncología. Muestras de plasma húmedo, mantenido a -70 ° C durante los períodos de tiempo correspondientes, también se utilizaron. Además, para poder distinguir los efectos del almacenamiento a largo plazo, los investigadores examinaron lo que sucede con la detección de proteínas como efecto del proceso de secado.

"Nuestra conclusión es que podemos medir los niveles de 92 proteínas con muy alta precisión y sensibilidad utilizando la tecnología PEA en pequeños, discos perforados de una mancha de sangre seca. El proceso de secado real tiene un efecto insignificante sobre las diversas proteínas y el efecto es reproducible, lo que significa que se puede incluir en el cálculo, "dice Johan Björkesten, estudiante de doctorado en la Universidad de Uppsala y primer autor del estudio.

El interés en utilizar biobancos para buscar proteínas o moléculas de ARN que puedan reflejar dinámicamente la progresión de la enfermedad está creciendo rápidamente. Las colecciones de muestras que comprenden muchas muestras tomadas regularmente de los mismos individuos son muy importantes para identificar biomarcadores de este tipo. Esto tiene dos ventajas. Primero, tiempo extraordinario, los individuos pueden actuar como sus propios controles. Segundo, después de que una persona se ha enfermado, las numerosas muestras tomadas mejoran las posibilidades de localizar muestras de pacientes tomadas antes del inicio de la enfermedad, en una fase en la que el diagnóstico precoz puede resultar especialmente valioso. Una condición previa para ello es la disponibilidad de un gran número de muestras, recopilados regularmente de muchas personas. Esto hace que sea esencial que los costos de las muestras individuales sean bajos y que todo el proceso, desde el muestreo hasta el almacenamiento, ser muy simple y, preferiblemente, no requerir la participación de personal sanitario.

El uso de DBS ofrece una serie de ventajas sobre el uso de muestras "húmedas". Algunos ejemplos son el estrés mínimo para los pacientes, ya que basta con un pinchazo autoadministrado en el dedo; los costos de recolección y almacenamiento son bajos; no se requiere personal altamente capacitado para el muestreo; las muestras se pueden enviar por correo postal; y las condiciones de almacenamiento son sencillas. Una de las principales limitaciones de las muestras secas, por otra parte, ha sido la pequeña cantidad de sangre extraída, lo que excluye muchos métodos analíticos tradicionales.

El almacenamiento de DBS a largo plazo afecta la detectabilidad de ciertas proteínas más que otras. La mayoría de las proteínas permanecen completamente intactas después de 30 años. o cambiar solo mínimamente, mientras que los niveles medidos de algunas proteínas disminuyen de modo que la mitad de la cantidad permanece después de un período de entre 10 y 50 años. Los investigadores también han descubierto que es preferible una temperatura de almacenamiento relativamente baja para las proteínas que se ven afectadas por el almacenamiento. En comparación con el almacenamiento de plasma húmedo a -70 ° C, encontraron que esto conservaba las proteínas mejor que el almacenamiento de DBS a -24 ° C. Esta parte del análisis fue, sin embargo, complicado por algunos factores de confusión que hicieron que la conclusión fuera menos clara.

El método de ensayo de extensión por proximidad (PEA) permite la detección de niveles de 96 proteínas (incluidos 4 controles) de un disco de 1,2 mm de diámetro extraído de una mancha de sangre seca (DBS) en papel de filtro. GUISANTE, basado en una investigación en la Universidad de Uppsala, se ha convertido en un producto comercial, Proseek Multiplex, por la empresa Olink de Uppsala. Hasta la fecha, la empresa ha utilizado el método para analizar un cuarto de millón de muestras de plasma húmedo.