Las curvas de calibración se usan para determinar la concentración de sustancias desconocidas basadas en mediciones previas de soluciones de concentraciones conocidas. La precisión y la precisión de las mediciones dependen de la curva de calibración. Cuanto mejor sea la curva, más precisa es la respuesta, cuanto peor es la curva, peor es la precisión. Este es un tipo de método de comparación, lo desconocido se compara con un conocido. Las curvas de calibración se usan para todos los tipos de mediciones usando muchas máquinas diferentes. Este ejemplo usa un espectrofotómetro.

Diluya la solución estándar a diferentes concentraciones. Es típico hacer una dilución de 10 veces, una dilución de 20 veces, una dilución de 30 veces o alguna otra solución paso a paso. Haga cada dilución dos veces para que todas las muestras estén duplicadas.

Calcule las concentraciones de las soluciones diluidas. Un ejemplo de la nueva concentración para la dilución de 10 veces sería la concentración de la primera solución multiplicada por 0.10.

Lea la absorbencia de las soluciones diluidas en el espectrofotómetro. Inserte una cubeta en el espectrofotómetro de modo que la marca del triángulo quede alineada con la trayectoria de la luz. Cierre la tapa del espectrofotómetro y presione el botón cero. Ponga a cero la máquina con agua destilada cada cinco muestras. Una vez que la máquina se pone a cero, lea las muestras de la misma manera. La única diferencia es que presionas enter para obtener la absorbencia. Presione enter luego de cerrar la tapa. Registre estos valores en un bloc de notas.

Grafique la absorbencia con las concentraciones conocidas calculadas para todas las muestras. La concentración conocida estará en el eje X y la absorbencia en el eje Y. Lo mejor es crear el gráfico en un programa de gráficos por computadora.

Use el programa de gráficos para calcular la línea de regresión para los puntos graficados. Es posible eliminar uno de los dos puntos para cada dilución para obtener la mejor línea de regresión. Este es el punto de hacer cada dilución por duplicado. Cuanto más cerca esté el valor R ^ 2 de uno, mejor será la línea de regresión. Tome nota de la ecuación de la línea de regresión.

Lea la absorbencia de la solución de concentración desconocida en el espectrofotómetro. Registre esta absorbencia.

Calcule la concentración de la solución desconocida usando la ecuación de la línea de regresión. La absorbancia desconocida se sustituye como Y en la ecuación. Estás resolviendo la ecuación para X, la concentración.