Las soluciones tampón resisten los cambios en el pH porque contienen conjugados ácidos-bases débiles que neutralizan los iones H + y OH-. Las soluciones tampón consisten en ácidos o bases débiles y la sal de ese ácido o base. La selección de un sistema de tampón apropiado depende del rango de pH para el almacenamiento en búfer. La mayoría de las reacciones biológicas se producen a un rango de pH de 6 a 8. Los tampones de fosfato se almacenan en el intervalo de pH de 6.5 a 7.5. Los tampones de ácido carboxílico son útiles desde pH 3 a 6. Los tampones de borato funcionan a partir de pH 8, 5 a 10. Los tampones de aminoácidos tales como glicina e histidina realizan en una diversidad de intervalos de pH. El buffer Tris es uno de los sistemas de buffer más utilizados en los laboratorios de biología. Los cálculos para una solución tampón Tris se usarán en el siguiente ejemplo, pero la metodología se aplica a cualquier solución tampón.
Utilice el producto de la molaridad y el volumen de la solución final para determinar los moles de base requeridos. Por ejemplo, si se necesitan 2 litros de una solución 0.1 M de tampón Tris, entonces el número de moles de Tris requeridos es:
0.1 moles /litro x 2 litros = 0.2 moles Tris base
Calcule la masa de tampón requerida multiplicando el número de moles necesarios por el peso molecular de la base. Por ejemplo, la masa de 0.2 moles de Tris base es igual a:
0.2 moles Tris x 121.1 g /mol Tris = 24.22 g Tris
Mida la masa apropiada de la base en una escala.
Disuelva la base en agua destilada usando una barra de agitación magnética y revolviendo la placa caliente. Disuélvelo en un volumen de agua solo ligeramente menor que el volumen de solución final (950 a 975 ml por cada litro de solución final). El pH del tampón Tris cambia con la concentración y necesita reajuste si se usa un volumen inicial demasiado pequeño. También es mejor preparar el tampón a la misma temperatura que se utilizará durante el ensayo o experimento, ya que Tris tiene grandes cambios de pH dependientes de la temperatura.
Valorar la solución acuosa de Tris con ácido clorhídrico 1 M usando un pH meter.
Lleve la solución al volumen final con agua destilada en un matraz volumétrico.
Consejo
Para ahorrar tiempo al preparar una solución tampón, puede usar concentrados de tampones prefabricados con el pH requerido y diluya la molaridad y el volumen deseados.
Prepare la solución tampón a la misma temperatura que la que utilizará para evitar cambios significativos de pH.
Evite los ajustes de pH que consumen mucho tiempo, valore solo después diluir a la concentración deseada. Disolverse en un volumen demasiado pequeño provocará titraciones repetidas.
Advertencia
Tenga precaución al manipular ácidos y bases.
Lleve gafas de protección.
