Los vectores de clonación son herramientas esenciales en la tecnología de ADN recombinante. Sirven como vehículos Para llevar y replicar el fragmento de ADN deseado, el insert , en una celda huésped.
Aquí hay un desglose de sus roles clave:
1. Llevando el inserto:
* Los vectores de clonación están diseñados para aceptar fragmentos de ADN extraños a través de sitios de enzimas de restricción específicos. Estos sitios a menudo son múltiples sitios de clonación (MC) que permiten la inserción de diferentes fragmentos de ADN.
* La secuencia de ADN del vector incluye un origen específico de replicación (ORI) que le permite replicarse independientemente dentro de la celda huésped.
* Los vectores de clonación también pueden contener genes que proporcionan resistencia a ciertos antibióticos. Esto permite la selección de células que han integrado con éxito el vector.
2. Replicando el inserto:
* Una vez que el inserto se integra en el vector, se introducen en una célula huésped, a menudo bacterias.
* La maquinaria de la célula huésped replica el vector y, por lo tanto, el fragmento de ADN insertado, junto con su propio ADN.
3. Facilitar la expresión génica:
* Algunos vectores, conocidos como vectores de expresión, contienen secuencias reguladoras (promotores, terminadores) que controlan la expresión del gen insertado. Esto permite la producción de la proteína codificada por el gen insertado.
4. Selección e identificación:
* Las secuencias específicas dentro del vector, como los genes de resistencia a los antibióticos, permiten a los investigadores seleccionar las células que han asumido el vector.
* Otras características, como los genes reporteros, pueden ayudar a identificar celdas que contienen el vector y el inserto.
Tipos de vectores de clonación:
Existen varios tipos de vectores de clonación, cada uno optimizado para diferentes aplicaciones:
* plásmidos: Pequeñas moléculas de ADN circulares encontradas en bacterias. Son fáciles de manipular y replicar en números altos.
* Bacteriófagos: Virus que infectan bacterias. Pueden transportar fragmentos de ADN más grandes que los plásmidos.
* cosmids: Vectores híbridos que combinan características de plásmidos y bacteriófagos. Son capaces de transportar fragmentos de ADN aún más grandes.
* cromosomas artificiales de levadura (YACS): Los vectores utilizados para clonar fragmentos de ADN muy grandes, incluso cromosomas enteros.
En general, los vectores de clonación son herramientas esenciales para:
* clonación del gen: Creando múltiples copias de genes específicos.
* Expresión del gen: Estudiar la función génica y producir proteínas de interés.
* Mapeo del genoma: Identificar y analizar el orden y la ubicación de los genes en los cromosomas.
* Ingeniería genética: Creación de organismos con los rasgos deseados.
En resumen, los vectores de clonación son cruciales para el éxito de la tecnología de ADN recombinante al proporcionar un medio para transportar, replicar y expresar secuencias de ADN extrañas dentro de una célula huésped. .
