1. Sistema de electroforesis:
* gel: Los tipos más comunes son la agarosa y la poliacrilamida. Los geles de agarosa se usan para moléculas más grandes, mientras que los geles de poliacrilamida se usan para moléculas más pequeñas.
* búfer: Una solución electrolítica que realiza electricidad y mantiene el pH del gel.
* Fuente de alimentación: Proporciona la corriente eléctrica que impulsa la migración de moléculas.
* peine: Crea pozos en el gel donde se cargan muestras.
2. Preparación de la muestra:
* muestra: Esto puede ser ADN, ARN, proteínas u otras moléculas que desea separar.
* Tinte de carga: Contiene un tinte de seguimiento que le permite monitorear el progreso de la electroforesis y una solución densa para ayudar a que la muestra se hunda en el pozo.
3. Detección y análisis:
* mancha: Utilizado para visualizar las moléculas separadas. Las manchas comunes incluyen:
* bromuro de etidio (ETBR) para ADN y ARN (fluoresces bajo luz UV)
* Coomassie Blue para proteínas
* Sistema de imágenes: Un sistema que puede capturar y analizar el gel teñido, como un transiluminador UV, un sistema de documentación de gel o escáner.
* Software: Para analizar los resultados, medir los tamaños de banda y calcular pesos moleculares.
4. Otro equipo:
* pipetas: Se usa para cargar muestras con precisión en los pozos de gel.
* Micropipette: Una pipeta pequeña que mide volúmenes muy pequeños de líquido.
* Guantes: Para proteger sus manos de productos químicos y manchas.
Mediciones clave en electroforesis:
* Distancia de migración: La distancia recorrió una molécula desde el pozo hasta su posición final en el gel.
* movilidad: Una medida de qué tan rápido se mueve una molécula en un campo eléctrico.
* Peso molecular: El tamaño de la molécula, que se puede estimar en función de su distancia de migración en relación con los estándares conocidos.
* Concentración: La cantidad de una molécula presente en una muestra, que puede medirse por la intensidad de la banda teñida.
Al usar este equipo y seguir protocolos establecidos, los científicos pueden separar y analizar efectivamente las biomoléculas utilizando electroforesis.
