Esquema de la formación de imágenes de la estructura 3D de tejido patológico mediante la combinación de tomografía de difracción óptica y costura automatizada. Crédito:Hugonnet et al., doi 10.1117 / 1.AP.3.2.026004
La histología es el estudio de tejidos biológicos a nivel microscópico. También llamada anatomía microscópica, la histología se utiliza ampliamente para proporcionar diagnósticos de cáncer y otras enfermedades. Por ejemplo, Las muestras de tejido obtenidas durante la cirugía pueden ayudar a determinar si se necesita una acción quirúrgica adicional. y se puede evitar una cirugía adicional si se puede obtener un diagnóstico rápidamente durante una operación.
Los métodos tradicionales en histopatología generalmente se limitan a muestras delgadas y requieren un procesamiento químico del tejido para proporcionar un contraste suficientemente alto para la obtención de imágenes. lo que ralentiza el proceso. Un avance reciente en histopatología elimina la necesidad de tinción química y permite obtener imágenes de alta resolución de secciones de tejido grueso. Como se informó en Fotónica avanzada , Un equipo de investigación internacional demostró recientemente una técnica de imágenes de fase cuantitativa sin etiquetas 3D que utiliza tomografía de difracción óptica para obtener información de imágenes volumétricas. La costura automatizada simplifica la adquisición y el análisis de imágenes.
Tomografía de difracción óptica
La tomografía de difracción óptica es una técnica de microscopía para reconstruir el índice de refracción de una muestra de tejido a partir de sus imágenes de campo disperso obtenidas con varios ángulos de iluminación. Permite la visualización de alto contraste sin etiquetas de muestras transparentes. El campo disperso complejo transmitido a través de la muestra se recupera primero usando holografía fuera del eje, luego, los campos dispersos obtenidos con varios ángulos de iluminación se mapean en el espacio de Fourier, lo que permite la reconstrucción del índice de refracción de la muestra.
Histopatología volumétrica de una muestra de tejido de páncreas de 100 μm de espesor sin marcar de un paciente con neoplasia papilar intraductal de la vía biliar en el hígado. A efectos de comparación, Los tejidos adyacentes se prepararon en láminas delgadas de tejido con el método de tinción H&E convencional. (la quinta fila, Aumento de 400x). Crédito:Hugonnet et al., doi 10.1117 / 1.AP.3.2.026004.
Una limitación reconocida de la tomografía de difracción óptica se debe a la compleja distribución de los índices de refracción, lo que da como resultado una aberración óptica significativa en la formación de imágenes de tejido grueso. Para superar esta limitación, el equipo utilizó el reenfoque digital y la costura automatizada, permitiendo la obtención de imágenes volumétricas de tejidos de 100 um de espesor sobre un campo de visión lateral de 2 mm x 1,75 mm mientras se mantiene una alta resolución de 170 nm x 170 nm x 1400 nm. Demostraron que la visualización simultánea de estructuras subcelulares y mesoscópicas en diferentes tejidos es posible gracias a una alta resolución combinada con un amplio campo de visión.
Rápido, histopatología precisa
Los investigadores demostraron la capacidad de su nuevo método mediante la obtención de imágenes de una variedad de diferentes patologías del cáncer:tumor neuroendocrino pancreático, neoplasia intraepitelial, y neoplasia papilar intraductal de la vía biliar. Ellos tomaron imágenes a escala milimétrica, sin manchar Tejidos de 100 μm de espesor con una resolución 3D subcelular, que permitió la visualización de células individuales y arquitecturas de tejidos multicelulares, comparable a las imágenes obtenidas con tejidos tradicionales procesados químicamente. Según YongKuen Park, investigador del Instituto Avanzado de Ciencia y Tecnología de Corea y autor principal del estudio, "Las imágenes obtenidas con el método propuesto permitieron una clara visualización de diferentes características morfológicas en los distintos tejidos permitiendo el reconocimiento y diagnóstico de lesiones precursoras y patologías".
Park señala que se necesita más investigación, pero los resultados sugieren un gran potencial para histopatología precisa durante la cirugía:"Se necesita más investigación sobre la preparación de muestras, velocidad de reconstrucción, y mitigación de la dispersión múltiple. Esperamos que la tomografía de difracción óptica proporcione diagnósticos más rápidos y precisos en consultas de histopatología y patología intraoperatoria ".