Por colaborador
Actualizado el 30 de agosto de 2022
Dominar el arte de la dilución es esencial para cualquiera que trabaje en química o microbiología. Las diluciones precisas mejoran la precisión del laboratorio, reducen la variabilidad y, en última instancia, generan datos más confiables. La siguiente guía paso a paso se basa en las mejores prácticas de laboratorio y los estándares de seguridad, lo que garantiza que realice cada dilución con confianza y precisión.
Para química o diluciones analíticas, utilice material de vidrio volumétrico, como una pipeta volumétrica y un matraz volumétrico. En microbiología, las pipetas serológicas y las probetas graduadas son apropiadas para transferir pequeños volúmenes manteniendo la solución contable.
Comience con una solución madre líquida, ya sea una muestra líquida pura o una solución preparada a partir de un polvo o líquido que se haya diluido a una concentración conocida.
Mida el volumen exacto de stock con una pipeta volumétrica y transfiéralo a un matraz volumétrico que contenga el volumen final deseado. Para una dilución 1:100, pipetee 1,0 ml de solución madre en un matraz de 100 ml y agregue 99 ml de diluyente para alcanzar un total de 100 ml.
Transfiera la solución madre con una pipeta serológica a un vaso de precipitados, luego agregue el diluyente con una probeta graduada. Para una dilución 1:100, agregue 1 ml de solución madre a 100 ml de diluyente, obteniendo un volumen final de 101 ml.
Utilice el diluyente especificado para su método. En microbiología, las opciones comunes incluyen medios, tampones y agua esterilizada. En química, los diluyentes pueden ser disolventes, ácidos, bases o agua desionizada, según el analito.
Agite el matraz a la mitad de la adición del diluyente para asegurar la homogeneidad, luego continúe agregando hasta alcanzar el volumen final.
Para los últimos mililitros, utilice un gotero para agregar diluyente en gotas individuales, asegurándose de que el volumen final se mida con precisión.
Sostenga el matraz o vaso de precipitados a la altura de los ojos y lea el borde inferior del menisco, la curva cóncava formada por la superficie del líquido. Alinee este punto con la escala del recipiente para una medición precisa.
Inserte una barra agitadora magnética en la dilución y coloque el recipiente en una placa agitadora o, si no hay una placa agitadora disponible, detenga el matraz, agítelo y déle la vuelta varias veces para mezclar.
Cuando se requiera un volumen final grande, realice diluciones en serie. Para una dilución 1:10.000, primero haga una dilución 1:100 (1 ml de solución madre en 100 ml de diluyente). Luego transfiera 1 ml de esta solución intermedia a otros 100 ml de diluyente. El efecto acumulativo produce una dilución de 1:10.000.
Siempre agregue ácido al agua, no al revés, para evitar reacciones exotérmicas. Comience agregando un pequeño volumen de agua al matraz antes de introducir el ácido, luego diluya hasta el volumen requerido.
Etiquete las diluciones claramente, evite reemplazar el líquido perdido durante la mezcla y siempre agregue ácido al agua para garantizar la seguridad y precisión.
Agregar agua al ácido puede producir reacciones violentas y lesiones graves. Utilice una pera de pipeta, nunca pipetee con la boca y siempre agregue ácido al agua.
