Cuando se prueba el efecto del pH sobre la actividad de la enzima, se debe variar el pH. Sin embargo, puedes hacer esto de buenas o malas maneras. Tenga en cuenta qué factores adicionales pueden confundir los efectos de la variación de pH. De lo contrario, los resultados obtenidos pueden no deberse al cambio en el pH, sino a algún otro factor. Saber cómo variar adecuadamente el pH y qué factores confunden el pH de un experimento lo ayudará a obtener buenos resultados y entender por qué los resultados pueden no ser exactamente los que esperaba.
Cambiar solo una cosa
Al realizar pruebas el efecto del pH sobre la actividad enzimática, varía solo el pH mientras mantiene constantes otros factores. Estos otros factores incluyen concentración de enzimas, concentración de sustrato y temperatura. Los factores que permanecen constantes se llaman variables de control. Las variables de control le permiten concluir que los resultados en la actividad enzimática obtenidos en su experimento se deben a la variación de pH, la variable independiente. Saber qué factores no cambiar en un experimento es tan importante como saber qué factor varía, de lo contrario será difícil determinar si los resultados se deben realmente a lo único que se probó.
Pick One Acid O una base
El pH de una solución se puede cambiar disolviendo en agua diferentes cantidades de un ácido o una base. Una forma de probar el efecto del pH sobre la actividad enzimática es agregar gradualmente gotas de un ácido fuerte o una base fuerte en la solución que contiene la enzima, y luego observar el punto en el que la actividad de la enzima se ralentiza o se detiene. Un ácido se define como un compuesto que dona un ion de hidrógeno, llamado protón (H +), y una base se define como un compuesto que dona un ion hidróxido (-OH). Diferentes ácidos y bases tienen diferentes números de protones o iones de hidróxido para regalar. No todos los protones o iones hidróxido se donan inmediatamente cuando se agrega un ácido o base a una solución, pero la cantidad de protones donados o iones de hidróxido cambia el pH a diferentes velocidades. Por lo tanto, es una buena idea variar el pH en un experimento de enzimas usando solo un tipo de ácido o un tipo de base. De lo contrario, se agregan involuntariamente otras variables.
Los tejidos también cambian el pH
Algunos experimentos de laboratorio que estudian la actividad enzimática implican la molienda de tejido fresco para liberar las enzimas de las células y luego agregar sustrato para medir la enzima actividad. El tejido fresco contiene sangre. Debido a la presencia de enzimas en la sangre que cambian el gas de dióxido de carbono que se disuelve en la sangre en ácido carbónico, el propio tejido puede afectar el pH. Por lo tanto, en experimentos que involucran actividad enzimática en tejido fresco, es útil lavar la sangre en un vaso de precipitados de agua fría antes de moler el tejido. Esto minimizará el cambio involuntario de pH debido al tejido, por lo que se puede estudiar el cambio intencionado en el pH.
Mantenga los tamaños iguales que en
Como se discutió anteriormente, la concentración de enzimas es un control factor que no debe variarse cuando se prueba el efecto del pH sobre la actividad enzimática. Sin embargo, los procedimientos experimentales aún varían inherentemente la concentración de enzimas de manera sutil. Si uno está usando una solución pura de enzimas, entonces mantener constante la concentración de la enzima. Sin embargo, en experimentos en los que la enzima es de tejido fresco, como trozos de patata, pedazos de plantas o trozos de hígado, el tamaño de los trozos cambia la cantidad de enzima en cada tubo de ensayo. Por lo tanto, será útil cortar los pedazos de tejido lo más uniformemente posible. Este es otro ejemplo de cómo saber qué no cambiar y por qué es difícil no evitar el cambio por completo, ayuda a interpretar los resultados de la variación de un factor como el pH.
