1. Análisis de fragmentos de ADN:
* Digestión de la enzima de restricción: Durante la clonación, utiliza enzimas de restricción para cortar su ADN de interés y el vector (plásmido) en secuencias específicas. Esto genera fragmentos de ADN de diferentes tamaños.
* electroforesis en gel: Los fragmentos de ADN se separan en función de su tamaño utilizando electroforesis en gel. Se usa una matriz de gel (generalmente agarosa) y se aplica una corriente eléctrica. Los fragmentos más pequeños viajan más rápido y más a través del gel que los fragmentos más grandes.
* Visualización: Los fragmentos de ADN se visualizan usando un tinte que se une al ADN y fluoresces bajo luz UV. Esto le permite ver las diferentes bandas de ADN en el gel, representando los diferentes tamaños de fragmentos de ADN.
2. Usos en la clonación:
* Verificación del resumen de restricción: La electroforesis ayuda a garantizar que las enzimas de restricción hayan cortado con éxito su ADN en los sitios correctos y que el vector tenga los sitios de restricción correctos para la ligadura.
* Análisis de clones: Después de la ligadura (unir el inserto de ADN con el vector), la electroforesis se usa para verificar que la ligadura ha tenido éxito. Puede comparar el tamaño de la molécula de ADN recombinante con el fragmento y el vector de ADN originales.
* Bibliotecas de detección: La electroforesis se puede utilizar para analizar los insertos de ADN en una biblioteca de clones, ayudando a identificar clones con el inserto deseado.
En resumen: La electroforesis no es parte del proceso de clonación del núcleo en sí, pero es una herramienta analítica esencial para verificar los diferentes pasos y garantizar que el experimento de clonación sea exitoso.
