1. Tamaño y complejidad:
* proteínas: Moléculas grandes y complejas formadas por largas cadenas de aminoácidos. Su tamaño varía de unos pocos miles a millones de Daltons. Tienen intrincadas estructuras 3D que influyen en su función.
* Pequeñas moléculas orgánicas: Generalmente mucho más pequeño y más simple, que consiste en unos pocos átomos o un pequeño número de grupos funcionales. Los ejemplos incluyen azúcares, lípidos, vitaminas y metabolitos pequeños.
2. Propiedades e interacciones:
* proteínas: Poseer una amplia gama de propiedades, que incluyen hidrofobicidad, hidrofilia, carga y actividad enzimática. Interactúan entre sí y otras moléculas a través de varias interacciones no covalentes (enlaces de hidrógeno, interacciones electrostáticas, interacciones hidrofóbicas), así como interacciones covalentes.
* Pequeñas moléculas orgánicas: Sus propiedades dependen de sus grupos funcionales y generalmente son más simples en comparación con las proteínas. Pueden interactuar entre sí o proteínas a través de interacciones más débiles.
3. Técnicas de aislamiento:
* proteínas: El aislamiento generalmente implica:
* Disrupción celular: Rompiendo células abiertas para liberar proteínas.
* Centrifugación diferencial: Separar proteínas basadas en el tamaño y la densidad.
* cromatografía: Separar proteínas basadas en su carga, hidrofobicidad o afinidad por ligandos específicos.
* electroforesis: Separar proteínas según su tamaño y carga.
* Pequeñas moléculas orgánicas: El aislamiento generalmente emplea:
* Extracción: Uso de solventes para eliminar las moléculas de su fuente.
* destilación: Separando moléculas basadas en el punto de ebullición.
* Cristalización: Separar moléculas basadas en su solubilidad.
* cromatografía: Separar moléculas basadas en su polaridad, tamaño o afinidad por una fase estacionaria.
4. Técnicas analíticas:
* proteínas: La caracterización implica:
* Espectroscopía: Medición de la concentración y estructura de proteínas.
* espectrometría de masas: Determinar el peso molecular y la secuencia de aminoácidos.
* Métodos inmunológicos: Detección de proteínas específicas usando anticuerpos.
* Pequeñas moléculas orgánicas: La caracterización generalmente usa:
* Espectroscopía (RMN, IR, UV-vis): Identificación de grupos funcionales y estructura.
* espectrometría de masas: Determinar el peso molecular.
* cromatografía: Identificar y cuantificar las moléculas.
En resumen:
El aislamiento de la proteína difiere de la pequeña molécula orgánica aislamiento debido a las diferencias significativas en el tamaño, la complejidad, las propiedades y las técnicas de aislamiento requeridas. Si bien ambos involucran la separación y la purificación, los métodos y los enfoques analíticos a menudo se adaptan a las propiedades específicas de la molécula que se está aislando.
