Aquí hay un desglose:
¿Qué es?
* Los adaptadores son secuencias de ADN pequeñas y diseñadas específicamente con extremos pegajosos , que son voladizos cortos y monocatenarios que pueden unirse a secuencias complementarias.
* Típicamente tienen 10-20 pares de bases de largo.
¿Cuál es su propósito?
1. Uniendo fragmentos de ADN con extremos incompatibles:
* A veces, los fragmentos de ADN que desea unir tienen diferentes sitios de corte de enzimas de restricción, lo que resulta en fines incompatibles.
* Los adaptadores se pueden ligar a los extremos de estos fragmentos, proporcionando extremos pegajosos compatibles que luego se pueden unir la ADN ligasa.
2. Creación de sitios de enzimas de restricción específicos:
* Es posible que necesite un sitio de enzimas de restricción específico para la clonación u otras manipulaciones.
* Los adaptadores se pueden diseñar para incluir estos sitios, lo que le permite crear el sitio de restricción deseado en el fragmento de ADN.
3. Agregar nuevas secuencias:
* Los adaptadores pueden transportar secuencias específicas como promotores, codones de inicio u otros elementos regulatorios.
* Estos se pueden agregar al fragmento de ADN ligando el adaptador.
Cómo funciona:
1. Digestión de restricción: El fragmento de interés de ADN se digiere con una enzima de restricción para crear extremos pegajosos.
2. Ligación del adaptador: El adaptador se liga a los extremos digeridos del fragmento de ADN, usando ADN ligasa.
3. Unirse con otros fragmentos: El fragmento modificado por el adaptador se puede unir con otros fragmentos, ya sea por ligadura o por otros métodos, para crear una molécula de ADN más grande.
Ejemplo:
* Imagine que desea insertar un gen en un plásmido.
* El gen se ha cortado con la enzima A, creando extremos pegajosos.
* El plásmido se ha cortado con la enzima B, creando diferentes extremos adhesivos.
* Puede usar un adaptador con extremos pegajosos compatibles con la enzima A y la enzima B para unir el gen y el plásmido.
En resumen:
Los adaptadores son herramientas versátiles en la tecnología de ADN recombinante que facilitan la unión de fragmentos de ADN, la creación de sitios de enzimas de restricción específicos y la adición de nuevas secuencias a las moléculas de ADN. Desempeñan un papel crucial en la manipulación del ADN para diversas aplicaciones, incluida la clonación de genes, la terapia génica y el diagnóstico.
