La razón principal por la que se mancha una muestra antes de colocarla bajo el microscopio es para verla mejor, pero la tinción hace mucho más que simplemente resaltar los contornos de las células. Algunas manchas pueden penetrar las paredes celulares y resaltar los componentes celulares, y esto puede ayudar a los científicos a visualizar los procesos metabólicos. Las manchas también ayudan a distinguir entre las células vivas y las muertas. Además, la tinción permite a los científicos contar el número de células de un tipo particular dentro de una biomasa determinada. Existen veinte o más tipos diferentes de manchas, y cada una tiene su propósito.
TL; DR (Demasiado larga; No leída)
El objetivo principal de la tinción es resaltar las células y partes de las celulas Existen más de 20 tipos diferentes de manchas y el tipo de tinción que usa depende de lo que esté buscando.
Tipos de manchas
La elección de la mancha depende de lo que esté buscando. No todas las manchas son adecuadas para células vivas, pero las que incluyen Bismarck son marrones, rojas de tolueno, azules del Nilo y rojas del Nilo, y ciertos fluorescentes se usan para resaltar el ADN. Algunas manchas resaltan las esporas, algunas detectan lípidos y proteínas y algunas cambian de color en presencia de almidones. El propósito del examen determina el mejor tipo de tinción para usar. Por ejemplo, un médico que realice un frotis de PAP usaría Eosin Y. Es un colorante fluorescente ácido que se vuelve rojo cuando entra en contacto con los glóbulos rojos, el citoplasma y las membranas celulares. También se usa para analizar la médula de la sangre.
En algunos casos, un investigador puede usar más de una mancha. Por ejemplo, la hematoxilina es una mancha que convierte los núcleos celulares en azules. Cuando se usa junto con eosina, que convierte las otras partes de la celda en rojas o rosadas, proporciona un contraste más fuerte y hace que los núcleos sean más fáciles de diferenciar. Los frotis de PAP y las muestras de médula ósea son más fáciles de examinar cuando estas dos manchas se usan juntas.
Tinción de Gram: los trabajadores del hospital usan la tinción de Gram para identificar bacterias dañinas. En realidad, se trata de una serie de colorantes que tienen diferentes efectos sobre distintos tipos de bacterias y brindan a los médicos una importante herramienta de diagnóstico. La mancha de Gram es un proceso de tres partes. En el primero, se agrega violeta de cristal de Hucker, que tiñe todas las bacterias de un color violeta uniforme. En la siguiente etapa, se agrega tintura de yodo, que hace que el color se adhiera a las células Gram-positivas, que son principalmente Staphylococcus y Streptococcus. La mancha se lava, dejando las células Gram-positivas con un color violeta distinto; luego se introduce una tercera tinción, Safranine O, para mejorar el contraste entre las bacterias Gram-negativas y el resto del material en la diapositiva.
Procedimiento de tinción
Al preparar una muestra en una deslice, puede montarlo en seco o mojado, puede cortarlo en una sección delgada o puede mancharlo. Cuando se usa una mancha, el procedimiento habitual es montar la muestra en húmedo, lo que significa colocar una gota de agua en el portaobjetos, colocar el espécimen en el agua y cubrirlo con un cubreobjetos. A continuación, aplica la mancha a una esquina de la diapositiva con un gotero y permite que se dibuje hacia la muestra por acción capilar. Ayuda a poner una toalla de papel en el lado opuesto de la diapositiva para atraer el agua. Una vez que la mancha se ha extendido por todo el portaobjetos, la muestra está lista para su examen.
