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    Ventana de limpieza óptica de cráneo no invasiva para imágenes corticales

    El diagrama esquemático y el rendimiento de la técnica de la ventana de limpieza óptica del cráneo (SOCW). (a) Cuatro pasos:inmovilización, limpieza óptica del cráneo, proyección de imagen cortical, y recuperación. (b) Se utiliza un dispositivo de inmovilización de la cabeza hecho a medida que consta de un soporte de cráneo y una placa fabricada a medida para reducir el artefacto de movimiento durante la obtención de imágenes. (c) Estructura anatómica del cráneo del ratón. (d) Esquema del SOCW. Se coloca una capa de envoltura de plástico sobre el cráneo limpiado para separar el objetivo de inmersión en agua del agente limpiador óptico (OCA). (e) Imágenes de fluorescencia representativas de las dendritas a través del cráneo, antes y después del aclarado óptico del cráneo. Descubrimos que la calidad de la imagen mejoró considerablemente y que era suficiente para obtener imágenes de las espinas dendríticas a través del cráneo despejado. (f) La profundidad de la imagen a través del SOCW. Proyecciones ortogonales (x-z) de dendritas, antes y después de la limpieza óptica del cráneo, demostrando que la profundidad mejora obviamente después de la limpieza (el parámetro de imagen y el procesamiento de datos eran los mismos). (g-h) La repetibilidad de la técnica SOCW. Imágenes repetidas de las dendritas (g) y las espinas (h) de las neuronas Thy1-YFP obtenidas durante un intervalo de 1 d. Barra de escala, 10 μm. Crédito:Ventana de limpieza óptica del cráneo para la obtención de imágenes in vivo de la corteza del ratón con resolución sináptica. Yan-Jie Zhao, Ting-Ting Yu, Chao Zhang, Zhao Li, Qing-Ming Luo, Tong-Hui Xu y Dan Zhu. Luz:ciencia y aplicaciones volumen 7, página 17153 (2018) doi:10.1038 / lsa.2017.153

    Los investigadores han demostrado un enfoque no invasivo para crear una ventana óptica en los cráneos de los ratones para obtener imágenes de sus cerebros. Prof. Dan Zhu y compañeros de trabajo de la Universidad de Ciencia y Tecnología de Huazhong, Porcelana, probaron el uso de agentes de limpieza óptica (OCA) que aplicaron a los cráneos desnudos (sin pelo y piel) de ratones vivos. Después del tratamiento con OCA, el cráneo se vuelve transparente en minutos, formando así una ventana visible en la corteza. Combinado con microscopía de dos fotones, esta técnica permite obtener imágenes de las estructuras finas de las neuronas, glía y la microvasculatura en el cerebro del ratón. Dada su fácil manejo, la seguridad, repetibilidad y excelente rendimiento, este método es prometedor en la investigación de la neurociencia. La investigación ha sido publicada en revista Luz:ciencia y aplicaciones .

    La observación y manipulación de las células de la corteza es fundamental para los estudios de la estructura y función del cerebro. Sin embargo, la fuerte dispersión causada por el cráneo sobre la corteza limita la profundidad de penetración de la luz en los tejidos, y por lo tanto dificulta la observación de estructuras neuronales y microvasculatura marcadas con fluorescencia. Para superar este obstáculo, El investigador desarrolló varios métodos de ventana craneal, incluyendo la ventana de cristal de cráneo abierto, la ventana craneal del cráneo adelgazado, y variantes. Pero estos métodos presentan limitaciones. La técnica de limpieza óptica de tejidos puede reducir la dispersión de los tejidos, que se ha convertido en una herramienta importante para las aplicaciones de la imagen óptica en la investigación biomédica. Sin embargo, El método actual de compensación óptica se utiliza ampliamente en los estudios ex vivo de tejidos y órganos. y hay pocos estudios sobre la transparencia de los tejidos vivos.

    El profesor Dan Zhu propuso en primer lugar el estudio de la técnica de compensación óptica in vivo. En la etapa inicial, se centró en investigar diferentes tipos de tejido cutáneo. Prof. Tonghui Xu, Colega del profesor Dan Zhu, se ha dedicado a la investigación de neuroimágenes corticales en ratones, y para la obtención de imágenes corticales in vivo, el cráneo turbio se convierte en un gran cuello de botella. Después de comunicarse con el profesor Tonghui Xu, El profesor Dan Zhu comenzó a investigar la limpieza óptica del tejido del cráneo. Después de seis años de arduo trabajo, desarrollaron un efectivo, Ventana de compensación óptica de calavera segura y conmutable. A través de esta ventana el contraste de la imagen y la profundidad de la imagen se mejoran significativamente, y las estructuras corticales pueden obtenerse imágenes con resolución sináptica. Esta técnica es muy prometedora para los estudios de la estructura y función del cerebro en estados fisiológicos o patológicos.

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