miniLM. Crédito:Instituto Francis Crick
Ningún microscopio puede obtener imágenes de todos los aspectos de una muestra al mismo tiempo, por lo que el uso de dos o más métodos de imágenes para estudiar una muestra (imágenes correlativas) es algo común.
Lucy Collinson dirige la Plataforma Tecnológica Científica de Microscopía Electrónica en el Instituto Francis Crick. La plataforma proporciona experiencia en la obtención de imágenes de las estructuras de moléculas, células y tejidos a alta resolución.
Las imágenes correlativas han permitido a los investigadores de Crick, que trabajan en colaboración con el equipo de Lucy, estudiar cómo se forman las sinapsis en el cerebro, los primeros procesos en la producción de proteínas de coagulación sanguínea y cómo se liberan las partículas del VIH de las células infectadas.
Ahora, colaborando con los fabricantes de instrumentos, El equipo de Lucy ha llevado la tecnología un paso más allá.
Han desarrollado una nueva forma de crear imágenes de estructuras que supera las limitaciones de la tecnología existente. Lo han hecho colocando un microscopio de luz fluorescente dentro de un microscopio electrónico.
"Un desafío importante en la obtención de imágenes correlativas es preparar la muestra de manera que se pueda obtener una imagen tanto en el microscopio óptico como electrónico, "explica Lucy." Desarrollamos un protocolo que conserva las proteínas fluorescentes que se iluminan con el microscopio óptico, mientras se tiñe e incrusta la muestra para que las células puedan verse en el microscopio electrónico y resistan el entorno de vacío. Esto nos permite obtener imágenes de las muestras en una sola máquina:un microscopio electrónico y de luz integrado ".
ultraLM. Crédito:Instituto Francis Crick
La obtención de imágenes de una muestra de esta manera revela la función dinámica de las proteínas (revelada por el microscopio óptico) dentro del contexto de la estructura celular y tisular (mostrada con gran detalle por el microscopio electrónico).
Martin Jones y Lizzy Brama, dos físicos dentro del grupo de Prototipos de Microscopía, diseñó y construyó un 'miniLM, 'similar en concepto a los sistemas de endoscopia de fluorescencia utilizados en la cirugía guiada por fluorescencia.
También diseñaron un segundo sistema, el 'ultraLM, 'que ayuda en la preparación de muestras de las células incrustadas en resina fluorescente en la herramienta ultramicrotomo que corta las muestras en secciones.
El trabajo de desarrollo se llevó a cabo en Crick, con la idea de que debería estar disponible para la comunidad como tecnología de código abierto. El objetivo es que cualquier instalación que tenga las habilidades para poder construir y adaptar estos microscopios de fluorescencia miniaturizados a sus propios microscopios electrónicos. También hay planes para licenciar la tecnología a fabricantes comerciales.