Aislar las bacterias del suelo es un primer paso importante en muchos experimentos de microbiología. Una vez aisladas, las bacterias pueden analizarse más a fondo para determinar cosas, como su especie y su función en el entorno del suelo. Incluso una pequeña cantidad de tierra puede contener millones de bacterias, lo que hace que sea necesario diluir una muestra de suelo antes de aislar las bacterias de la muestra.
Mida 100 ml. agua destilada en el cilindro graduado y agréguela a la botella estéril.
Pese 1 g de la muestra de suelo y agréguela a la botella de agua destilada. Cierre bien la botella y sacúdala para mezclar completamente la solución.
Etiquete los tubos de ensayo estériles "10 ^ -3", "10 ^ -4", "10 ^ -5" y "10 ^ - 6. " Agregue 9 ml de agua destilada a cada uno de los tubos, usando una de las pipetas.
Transfiera 1 ml de la solución en el frasco al tubo con la etiqueta "10 ^ -3", usando una pipeta nueva. Tape el tubo y gírelo suavemente hasta que la solución esté bien mezclada.
Transfiera 1 ml de la solución en el tubo de ensayo "10 ^ -3" al tubo "10 ^ -4" con una nueva pipeta. Tape el tubo "10 ^ -4" y agite para mezclar. Repita este método para transferir la solución del tubo "10 ^ -4" al tubo "10 ^ -5" y luego del tubo "10 ^ -5" al tubo "10 ^ -6".
Platee tres muestras de los tubos "10 ^ -4", "10 ^ -5" y "10 ^ -6". Use una nueva pipeta para transferir 1 ml de solución del tubo a una placa de Petri. Agregue alrededor de 15 ml de agar nutriente a la placa; luego coloque la tapa sobre la placa y gire suavemente para que el agar cubra el fondo de la placa.
Haga una placa de control colocando 1 ml de agua destilada en una placa de Petri, usando una nueva pipeta. Agregar agar; ponga la tapa y agite el plato.
Deje las placas de Petri en posición vertical hasta que el agar se haya asentado. A continuación, invierta las placas e incúbelas, ya sea en una incubadora oa temperatura ambiente, durante tan solo 24 horas y hasta cinco días.
Retire las placas de la incubadora después de la cantidad deseada de tiempo de incubación. Cuente las colonias bacterianas en placas que contienen alrededor de 30 a 300 colonias. Use un marcador permanente para marcar las colonias que ya ha contado para evitar contar las mismas colonias dos veces.
Divida el número de colonias contadas por la dilución: "10 ^ -4", "10 ^ -5" "o" 10 ^ -6 "-de la solución del suelo para cada placa. Encuentre el número de bacterias cultivables en el gramo de suelo original promediando los resultados de cada placa contable.
TL; DR (Demasiado tiempo; No lo leyó)
Siga las técnicas de laboratorio asépticas en todo el procedimiento.
Advertencia
Para evitar la contaminación y la posible infección de las bacterias, asegúrese de desechar correctamente todas las placas de Petri, las soluciones para el suelo y las pipetas.
Solo este procedimiento mide bacterias cultivables. Según la Universidad de Cornell, entre 90 y 99 por ciento de las bacterias del suelo no crecerán en agar nutritivo.
