Materiales:
* Base Tris (Tris (hidroximetil) aminometano)
* Solución 1 M HCL
* Agua desionizada
* Medidor de pH o papel indicador de pH
* Cilindro graduado
* Precipitante
* Varilla de agitación
Procedimiento:
1. Calcule la cantidad de base de Tris:
* Tris tiene un peso molecular de 121.14 g/mol.
* Para preparar 1 litro de solución de tris 0.1 m, necesita:
* 0.1 mol/l * 121.14 g/mol =12.114 g de la base de Tris
* Ajuste la cantidad proporcionalmente si necesita un volumen diferente de búfer.
2. Disolver la base Tris:
* Pese la cantidad calculada de la base Tris y disuelva en aproximadamente 800 ml de agua desionizada en un vaso de precipitados de 1 litro.
* Revuelva a fondo para garantizar la disolución completa.
3. Ajuste el pH:
* usando un medidor de pH: Agregue lentamente la solución de HCl 1 M a la solución Tris mientras monitorea continuamente el pH usando un medidor de pH. Revuelva bien después de cada adición.
* Uso de papel indicador de pH: Agregue pequeñas cantidades de HCl hasta que se alcance el pH deseado de 8.0, como lo indica el papel de pH.
4. Configurar en el volumen final:
* Una vez que se logra el pH deseado, agregue agua desionizada para llevar el volumen final a 1 litro.
5. Compruebe y ajuste el pH:
* Vuelva a verificar el pH con un medidor de pH o papel indicador y haga ajustes menores con HCl o una solución diluida de NaOH, si es necesario.
Notas importantes:
* Seguridad: La base Tris es ligeramente irritante para la piel y los ojos. Use gafas de seguridad y guantes apropiados durante el manejo.
* PH Calibración del medidor: Asegúrese de que su medidor de pH esté correctamente calibrado antes de su uso.
* Efectos de temperatura: El pH de un tampón Tris depende ligeramente de la temperatura. Tenga en cuenta esto si necesita usar el búfer a temperaturas significativamente diferentes de la temperatura de calibración.
* Almacenamiento: Guarde el búfer preparado a temperatura ambiente o en un refrigerador para almacenamiento extendido.
Consejos adicionales:
* Ajuste de pH: Por lo general, es más fácil ajustar el pH hacia abajo agregando HCL que elevarlo agregando NaOH.
* Precisión: Un medidor de pH le dará una lectura más precisa que el papel de pH.
* múltiples buffers: Si necesita preparar varios amortiguadores, es más eficiente hacer una solución comercial concentrada de Tris y diluirla según sea necesario.
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