Escherichia coli, E. coli, es una bacteria que crece en los intestinos inferiores de los mamíferos. Esta bacteria se descubrió por primera vez a fines del siglo XIX. Desde entonces, ha tenido una larga historia de uso en la investigación científica. Es el organismo más utilizado en genética molecular. Parte de la razón por la que E. coli se usa comúnmente en la investigación científica es que es fácil de cultivar en un laboratorio. Los factores que hacen que E. coli sea fácil de cultivar son sus simples necesidades nutricionales, su rápida tasa de crecimiento y sus moderados requisitos de mantenimiento.
Esterilice el circuito de inoculación colocándolo en la llama del quemador Bunsen. Pase la mitad inferior del lazo a través de la llama hasta que se ilumine en rojo.
Permita que el circuito se enfríe. Puede tocarlo en el agar estéril en la placa para asegurarse de que se haya enfriado. No coloque el lazo sobre la mesa ni lo deje en contacto con nada que no sea agar estéril o el cultivo deseado ahora que ha sido esterilizado.
Sumerja el asa en el cultivo de E. coli y luego quítelo.
Abra la placa de agar y deslice suavemente el lazo hacia adelante y hacia atrás a través de la superficie de una sección del agar. Tenga cuidado de no rasguñar a través del agar con el lazo. El agar proporciona los nutrientes que E. coli necesita para crecer.
Vuelva a colocar el lazo en la llama del mechero Bunsen para esterilizarlo. Una vez que se enfríe la varilla de bucle, tóquela a una sección estéril de la placa para asegurarse de que esté fría, luego deslice el lazo a través de su primera veta para hacer una segunda veta. Esta segunda racha es una versión diluida de la primera racha. Repita este proceso de esterilización y deslizamiento hasta que se hayan deslizado varias secciones de la placa de agar. La razón por la que haces esto es para que luego puedas elegir entre colonias individuales y clónicas. Esto te ayudará a asegurarte de tener al menos una sección que tenga colonias individuales, no demasiado concentradas (que tendrán demasiado crecimiento y no te permitirán elegir de una sola colonia) y no demasiado diluidas (lo que no daría colonias). .
Esterilice el lazo en la llama una última vez antes de dejarlo de lado en el área de trabajo.
Vuelva a colocar la parte superior sobre la placa de agar. Voltee el plato boca abajo y colóquelo en la incubadora a 37 grados Celsius (98.6 grados Fahrenheit). Esta temperatura de incubación ideal simula la temperatura del cuerpo humano donde reside E. coli. Dentro de las 24 a 48 horas, aparecerán colonias visibles de bacterias E. coli en la placa de agar.
Advertencia
La correcta contención de las muestras de E. coli y la esterilización del circuito de inoculación reducirá la posibilidad de propagar la bacteria No debe consumirse comida o bebida en el área de experimentación. El uso de guantes reducirá aún más el riesgo de contaminación de las manos.
