El nuevo ensayo desarrollado en KAUST es un ensayo de laminación celular multicelular fluorescente que utiliza etiquetas fluorescentes únicas para marcar hasta siete tipos de población celular. Crédito:© 2020 Elham Roshdy
Los investigadores de la Universidad de Ciencia y Tecnología King Abdullah han desarrollado un método robusto y eficiente para examinar las interacciones entre las células utilizando etiquetado fluorescente. analizar simultáneamente múltiples poblaciones de células, y acelerar un proceso que alguna vez fue tedioso y limitante. El nuevo ensayo también tiene aplicaciones en el estudio de procesos celulares en la inflamación o metástasis de células cancerosas y en la evaluación de tratamientos potenciales.
Las células se mueven a través de los vasos sanguíneos a través de la adhesión celular. la interacción y unión de las células entre sí a través de moléculas especializadas en la superficie celular. Durante el flujo sanguíneo, Las fuerzas de cizallamiento actúan sobre las células para orquestar la adhesión celular. La manipulación de la adhesión celular puede provocar inflamación y enfermedades como el cáncer, mientras que los patógenos como los virus aprovechan la adhesión celular para infectar el cuerpo.
"El ensayo convencional utilizado para estudiar las interacciones célula-célula es el ensayo de cámara de flujo de placas paralelas (PPFC), que registra videos de células rodando en flujo y adheridas a moléculas en células endoteliales (células que recubren los vasos sanguíneos), "dice el líder del grupo Jasmeen Merzaban." Este ensayo se ha utilizado durante décadas, pero es propenso a errores y posibles sesgos, y solo puede analizar un tipo de celda a la vez, por lo que consume mucho tiempo ".
Ayman AbuElela, con los otros estudiantes de posgrado en el laboratorio de Merzaban, quería mejorar PPFC y acelerar los análisis.
Su nuevo ensayo de laminación de células multicelulares fluorescentes (FMCR) utiliza etiquetas fluorescentes únicas para marcar hasta siete tipos de poblaciones de células. Las muestras de células se mezclan justo antes de entrar en el flujo simulado sobre una capa de células endoteliales. Un microscopio confocal espectral captura imágenes de las poblaciones de células mixtas en tiempo real a alta resolución temporal en una sola pasada. Esto permite a los investigadores recopilar datos sobre la cinética celular, incluida la frecuencia de laminación, velocidad y capacidad de anclaje de tipos de células individuales.
A diferencia del ensayo de balanceo celular estándar, que requiere una ejecución del experimento para cada tipo de celda, El nuevo ensayo de laminación de células multicelulares fluorescentes del equipo utiliza etiquetas fluorescentes únicas para marcar hasta siete tipos de poblaciones de células. Crédito:© 2020 KAUST
"Desarrollamos una completa línea de análisis de datos, lo que nos permite analizar los múltiples tipos de células que obtenemos mediante este enfoque y logra una alta potencia estadística y sensibilidad, ", dice AbuElela." El FMCR ahora se utiliza en nuestro laboratorio para estudiar la migración de varias células humanas, incluidas las células madre, células inmunes activadas y células de cáncer de mama ".
Otra ventaja del nuevo procedimiento es que antes o durante el ensayo, se puede añadir a las células un compuesto de prueba, como un nuevo fármaco, para investigar el efecto del compuesto sobre la adhesión celular.
"Dichos estudios brindan información importante sobre el efecto de los tratamientos en la migración y metástasis de las células y sobre cómo los medicamentos podrían funcionar dentro del cuerpo". "señala Merzaban.
