Un microbiólogo usa la tinción de quitina para poder ver los hongos claramente bajo el microscopio. Los hongos usan quitina como material estructural en sus paredes celulares para que la mancha muestre bien la pared celular. La tinción azul de algodón lactofenol es la tinción más común para los hongos. El fenol mata los microorganismos y evita que las enzimas fúngicas descompongan la célula. El tinte azul algodón convierte la quitina en azul. La tinción de quitina es un procedimiento relativamente sencillo con materiales de bajo costo. Puede hacer su propio tinte o comprar una tintura preparada comercialmente.
Prepare una solución de azul de algodón lactofenol. Pese 0.05 gramos de tinte azul algodón usando una balanza sensible. Mezcle el tinte con 20 mililitros de agua destilada en un tubo de ensayo y déjelo durante la noche.
Colóquese los guantes antes de terminar la preparación de la mancha al día siguiente. Coloque 20 ml de ácido láctico en un vaso de precipitados y mezcle con 20 g de cristales de fenol. Revuelva hasta que la mezcla se disuelva. Agregue 40 ml de glicerol y mezcle. Luego, cuele la solución de algodón azul a través de un trozo de papel de filtro en el vaso de precipitados y mezcle bien.
Alternativamente, use una fuente de la mancha preparada comercialmente. Almacene la mancha a temperatura ambiente.
Etiquete una diapositiva del microscopio con el nombre o número de identificación de la muestra. Use un cuentagotas estéril para colocar una sola gota de una muestra de agua en el centro del portaobjetos del microscopio. Para una muestra seca, coloque una sola gota de solución de alcohol al 70 por ciento en el portaobjetos, y luego use un asa estéril para mezclar la muestra seca en el alcohol.
Use un gotero limpio para transferir dos gotas del lactofenol mancha de algodón azul en el centro de la diapositiva. Si usa un 70 por ciento de alcohol en el portaobjetos, hágalo antes de que el alcohol se evapore del portaobjetos.
Toque un borde del cubreobjetos del microscopio con un borde de la preparación de muestra húmeda. Deje que el deslizamiento caiga suavemente sobre la preparación de la muestra, asegurándose de que no atrape burbujas de aire debajo del tobogán. La muestra teñida ahora está lista para examinarse bajo el microscopio.
