Las técnicas cromatográficas se realizan en laboratorios científicos para separar compuestos químicos de una muestra desconocida. La muestra se disuelve en un disolvente y fluye a través de una columna, en la que se separa por la atracción del compuesto contra el material de la columna. Esta atracción polar y no polar al material de la columna es la fuerza activa que hace que los compuestos se separen con el tiempo. Los dos tipos de cromatografía utilizados hoy en día son la cromatografía de gases (GC) y la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC).
Mobile Carrier Phase
La cromatografía de gases vaporiza la muestra y se transporta a lo largo del sistema un gas inerte como el helio. El uso de hidrógeno produce una mejor separación y eficiencia, pero muchos laboratorios prohíben el uso de este gas debido a su naturaleza inflamable. Cuando se usa la cromatografía de líquidos, la muestra permanece en estado líquido y es empujada a través de la columna a altas presiones por varios solventes como agua, metanol o acetonitrilo. Diferentes concentraciones de cada solvente afectarán la cromatografía de cada compuesto de manera diferente. Tener la muestra en estado líquido aumenta la estabilidad del compuesto.
Tipos de columnas
Las columnas de cromatografía de gases tienen un diámetro interno muy pequeño y su longitud puede oscilar entre 10 y 45 metros. Estas columnas a base de sílice están enrolladas a lo largo de un marco de metal circular y se calientan a una temperatura de 250 grados Fahrenheit. Las columnas de cromatografía líquida también están basadas en sílice pero tienen una carcasa metálica gruesa para soportar altas cantidades de presión interna. Estas columnas funcionan a temperatura ambiente y tienen un rango de 50 a 250 centímetros de longitud.
Estabilidad del compuesto
En la cromatografía de gases, la muestra inyectada en el sistema se vaporiza a aproximadamente 400 grados Fahrenheit antes de que se llevado a través de la columna. Por lo tanto, el compuesto debe ser capaz de soportar el calor a altas temperaturas sin descomponerse ni degradarse a otra molécula. Los sistemas de cromatografía líquida permiten al científico analizar compuestos más grandes y menos estables porque la muestra no está expuesta al calor.
