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  • Medición de la zona de inhibición:una guía práctica para las pruebas de susceptibilidad a los antibióticos

    Por Elliot Walsh, actualizado el 24 de marzo de 2022

    Las bacterias son los organismos más prolíficos del planeta, con más de un billón de especies y más de cinco millones de billones de billones individuos. Aunque menos del 1% de estos microbios causan enfermedades en los humanos, pueden variar desde malestar estomacal leve hasta infecciones potencialmente mortales como la peste bubónica, que mató a unos 50 millones de personas en el siglo XIV.

    Antibióticos y sus mecanismos de acción

    Los antibióticos se dirigen selectivamente a estructuras y procesos bacterianos, sin afectar a las células humanas. Las clases comunes incluyen:

    • Beta‑lactámicos (p. ej., penicilina) alteran la síntesis de la pared celular y provocan la lisis bacteriana.
    • Macrólidos (p. ej., eritromicina) se unen a los ribosomas bacterianos, bloqueando la síntesis de proteínas.
    • Quinolonas interfiere con la replicación del ADN al inhibir la girasa y la topoisomerasa IV.

    Prueba de resistencia a los antibióticos

    Desde la década de 1920, las bacterias han desarrollado resistencia, lo que impulsó el desarrollo de ensayos de susceptibilidad estandarizados. Los primeros métodos implicaban diluciones en serie de cultivos bacterianos en placas cargadas de antibióticos, lo que consumía mucho tiempo y era variable.

    Prueba de difusión en disco de Kirby-Bauer

    Estandarizada por los microbiólogos W.M.M.Kirby y A.W.Bauer, la prueba Kirby-Bauer sigue siendo el estándar de oro para la detección de resistencia rápida y confiable. El procedimiento es sencillo:

    1. Extienda un aislado bacteriano puro en una placa de agar.
    2. Coloque discos cargados de antibióticos en la superficie; cada disco contiene un antibiótico específico.
    3. Incubar la placa en condiciones óptimas.

    A medida que el antibiótico se difunde hacia afuera, las bacterias susceptibles se inhiben, creando un área circular clara sin crecimiento alrededor de cada disco, conocida como zona de inhibición. El tamaño de esta zona refleja directamente la sensibilidad bacteriana:las zonas más grandes indican una mayor susceptibilidad; las zonas más pequeñas sugieren resistencia.

    Medición de la zona de inhibición

    La medición precisa es fundamental para interpretar los resultados. Siga estos pasos:

    1. Coloque la placa de agar sobre una superficie no reflectante.
    2. Utilizando una regla milimétrica o un calibre, coloque la marca cero en el centro del disco de antibiótico.
    3. Mida desde el centro del disco hasta el borde exterior de la zona de inhibición (radio). Multiplique por dos para obtener el diámetro o mida directamente a lo largo de la zona (diámetro).

    Todas las medidas deben registrarse en milímetros (mm).

    Utilice las tablas de referencia CLSI para interpretar el diámetro en relación con las especies bacterianas y el antibiótico. Estos gráficos se pueden encontrar aquí .




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