Biopanning es una técnica poderosa utilizada en biología molecular y biotecnología para identificar y seleccionar anticuerpos específicos De una gran biblioteca de fragmentos de anticuerpos . Es como la pesca, pero en lugar de atrapar peces, estamos buscando el anticuerpo perfecto que se une a nuestra molécula objetivo.
Aquí hay un desglose del proceso:
1. La biblioteca: El punto de partida es una biblioteca de visualización de fagos , que contiene millones de fragmentos de anticuerpos diferentes (generalmente fragmentos variables de cadena única o SCFV) que se muestran en la superficie de los bacteriófagos. Cada fago lleva un fragmento de anticuerpos diferente codificado por su ADN.
2. El objetivo: El objetivo es encontrar el anticuerpo que se una específicamente a una cierta molécula objetivo (por ejemplo, una proteína, un virus, una bacteria).
3. La panorámica: Aquí es donde sucede la "pesca":
* inmovilizar el objetivo: La molécula objetivo está unida a una superficie sólida, como un pozo de plástico o cuentas magnéticas.
* Incubar con la biblioteca: La biblioteca de fagos que contiene millones de fragmentos de anticuerpos se agrega al objetivo.
* Lave los fagos no unidos: Solo aquellos fagos con anticuerpos que se unen al objetivo permanecerán conectados.
* elte y amplifique: Los fagos unidos se liberan del objetivo y se amplifican por infectar bacterias, lo que resulta en una nueva biblioteca enriquecida para anticuerpos específicos.
4. Ciclos repetidos: El proceso de panorama, lavado y amplificación se repite varias veces, cada una ronda enriqueciendo aún más la biblioteca para fagos que transportan anticuerpos con mayor afinidad al objetivo.
5. Caracterización y validación: Finalmente, los fragmentos de anticuerpos seleccionados se clonan, expresan y se caracterizan para confirmar su especificidad y afinidad de unión.
Beneficios del biopanning:
* Alto rendimiento: Permite la detección de millones de anticuerpos en poco tiempo.
* Alta especificidad: Identifica anticuerpos con excelente afinidad y selectividad para un objetivo.
* Versatilidad: Aplicable para varias moléculas objetivo (proteínas, péptidos, carbohidratos, etc.).
Aplicaciones de biopanning:
* Descubrimiento de drogas: Identificación de terapias basadas en anticuerpos para diversas enfermedades.
* Diagnóstico: Desarrollo de herramientas de diagnóstico para la detección de enfermedades tempranas.
* Bio-Imagening: Creación de anticuerpos para visualizar moléculas específicas en células o tejidos.
* Herramientas de investigación: Producción de anticuerpos para estudiar la función de proteínas e interacciones.
Biopanning es una herramienta poderosa para desarrollar nuevos anticuerpos con diversas aplicaciones en medicina, diagnóstico e investigación. Nos permite buscar eficientemente el "pez" perfecto de anticuerpo de una vasta biblioteca de candidatos, lo que lleva a avances en varios campos.